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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物组织GFP绿色荧光观察
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

莎莎乐happy(金币+2): 2011-11-17 16:07:57
引用回帖:
10楼: Originally posted by terry130 at 2011-11-17 09:03:14:
用激光共聚焦的话不需要特别处理样本，不过你的样本厚度有要求，不能太厚，否则激光的穿透性会受影响。如果你的样本厚度超过10um的话就要现做物力切片，石蜡或者冰冻都行。然后再用这个片子上共聚焦。共聚焦在10 ...

忘了说了，如果想要结果稳定的话，样本可以固定一下，福尔马林固定液就可以~
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摒气动方息，宁神心自明。
11楼2011-11-17 09:04:12
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)
激光共聚焦 我最近也打算做 先看看
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12楼2011-11-17 09:44:01
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 莎莎乐happy at 2011-11-17 08:55:06:
wangy0908
你好！我用的GFP是问别的实验室要的，中间含有别的基因，连PUC，一句话说就是加工过的，在网上找不到其序列。是个中间载体。你要吗？而且现在GFP荧光检测还没做，不知道是否能检测到，也就是我不敢保 ...

楼主下次可以试试“引用回复”，别人可以接到通知的，效果你应该看到了
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13楼2011-11-17 18:40:20
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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by terry130 at 2011-11-17 09:03:14:
用激光共聚焦的话不需要特别处理样本，不过你的样本厚度有要求，不能太厚，否则激光的穿透性会受影响。如果你的样本厚度超过10um的话就要现做物力切片，石蜡或者冰冻都行。然后再用这个片子上共聚焦。共聚焦在10 ...

你好！我想问一下做成切片的话，做3D 图像是什么样的呀？你能不能给我发张图片，我看一下效果。总觉得做切片看到的应该是细胞水平的。
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14楼2011-11-17 22:27:44
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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by terry130 at 2011-11-17 09:03:14:
用激光共聚焦的话不需要特别处理样本，不过你的样本厚度有要求，不能太厚，否则激光的穿透性会受影响。如果你的样本厚度超过10um的话就要现做物力切片，石蜡或者冰冻都行。然后再用这个片子上共聚焦。共聚焦在10 ...

你好！打扰了！还想问你个问题，做石蜡切片后，还需要染色不？石蜡包埋的样本直接可以看吗？
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15楼2011-12-12 18:16:22
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

莎莎乐happy(金币+5): 2011-12-15 09:59:29
内容已删除
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摒气动方息，宁神心自明。
16楼2011-12-15 09:03:16
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

莎莎乐happy(金币+5): 2011-12-15 09:59:41
引用回帖:
15楼: Originally posted by 莎莎乐happy at 2011-12-12 18:16:22:
你好！打扰了！还想问你个问题，做石蜡切片后，还需要染色不？石蜡包埋的样本直接可以看吗？

石蜡切片后是否染色看你的需要了，如果你是GFP的话当然不用再染任何东西了。如果是做免疫荧光的话你需要再去做抗体和荧光标记识别。

石蜡包埋的样本要先切成石蜡切片，然后在玻片上粘片，脱蜡。如果你不染色的话脱蜡后可以直接封片，如果要染色的话脱蜡后要根据你染色的液体环境做具体操作，比如用抗体做标记的话你需要先复水到水环境然后再用抗体处理，最后再封片。。。

封片后的样品可以直接去观察了，要注意在显微镜设置里选择正确的封片介质折光率。
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摒气动方息，宁神心自明。
17楼2011-12-15 09:06:51
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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by terry130 at 2011-12-15 09:06:51:
石蜡切片后是否染色看你的需要了，如果你是GFP的话当然不用再染任何东西了。如果是做免疫荧光的话你需要再去做抗体和荧光标记识别。

石蜡包埋的样本要先切成石蜡切片，然后在玻片上粘片，脱蜡。如果你不染色的 ...

石蜡会不会影响绿色荧光的观察呀？
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18楼2011-12-15 10:01:31
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

莎莎乐happy(金币+3): 2011-12-15 18:26:24
引用回帖:
18楼: Originally posted by 莎莎乐happy at 2011-12-15 10:01:31:
石蜡会不会影响绿色荧光的观察呀？

我不是说了吗，在上镜之前是要脱蜡的。。。。就是说上镜的时候已经没有石蜡存在于样品中了。。。
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fishyr
摒气动方息，宁神心自明。
19楼2011-12-15 16:16:30
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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by terry130 at 2011-12-15 16:16:30:
我不是说了吗，在上镜之前是要脱蜡的。。。。就是说上镜的时候已经没有石蜡存在于样品中了。。。

谢谢！
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20楼2011-12-15 18:26:39
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