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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » native与sds有差异，怎么解释？
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dongdyp

金虫 (正式写手)

[求助] native与sds有差异，怎么解释？

问题是这样的：同一个蛋白，跑sds是67KD，native是87KD，都切胶做质谱，是同一个蛋白，且没有杂质。怎么解释？
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1楼 2011-11-10 15:17:05
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-11-11 09:52:02
变性胶跑的是亚基，Native是复合体，有可能是此蛋白有两个或以上的亚基组成，供楼主参考！
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jiayoubashaonian
2楼2011-11-10 21:52:31
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dongdyp

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-11-10 21:52:31:
变性胶跑的是亚基，Native是复合体，有可能是此蛋白有两个或以上的亚基组成，供楼主参考！

那这个是二聚体还是单体呢？
有类似文献么？
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3楼2011-11-11 02:55:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
1949stone(金币+1): 交流 和 提问 支持 2011-11-11 09:52:34
非变性胶的迁移率跟很多因素有关，你是怎样确定分子量的，用什么分子量标准，哪个公司产的，原理是什么？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-11-11 03:26:11
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dongdyp

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励交流!多应助有奖励! 2011-11-11 12:04:49
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-11-11 03:26:11:
非变性胶的迁移率跟很多因素有关，你是怎样确定分子量的，用什么分子量标准，哪个公司产的，原理是什么？

用的GE的HMW Native Marker Kit
High protein molecular weight standards in the range Mr 66 000 – 669 000. 如图所示第三条
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5楼2011-11-11 09:24:10
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4, MolEPI+1): 知识渊博,连同2一起, 破格奖励EPI一枚! 2011-11-11 12:04:18
引用回帖:
3楼: Originally posted by dongdyp at 2011-11-11 02:55:09:
那这个是二聚体还是单体呢？
有类似文献么？

楼主可以看一下SDS-page和Native的原理
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jiayoubashaonian
6楼2011-11-11 10:44:49
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rodickholm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

NATIVE只能看PI吧，MW不准的
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7楼2011-11-11 18:01:10
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
我一向以为活性胶的迁移率与多因素有关，是不存在分子量标准物的，你可以把那个产品说明书阅读一下，或者发上来，我想知道那个公司为什么能把多因素影响的迁移率弄一个单因素的标准，又不是SDS-PAGE。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2011-11-11 20:15:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 火眼厉害! 2011-11-11 21:38:59
引用回帖:
5楼: Originally posted by dongdyp at 2011-11-11 09:24:10:
用的GE的HMW Native Marker Kit
High protein molecular weight standards in the range Mr 66 000 – 669 000. 如图所示第三条

http://www.biocity.biz/Catalog/Reagent/Amersham/200510/63.html
这个是产品简介，你发的是变性的，不是自然的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2011-11-11 20:22:39
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