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mingongren

新虫 (初入文坛)

[交流] 大肠杆菌在PBS之类的缓冲液中4度能保持活性多久啊 已有6人参与

没有离心沉淀,悬浮的大肠杆菌,在PBS中4度能保持一周活性吗?

我实验中想使用相同的细菌浓度,不想每天反复调配溶液,能不能就把用PBS配好的悬液放在4度保存一段时间?这样应该不会再增殖了吧?也就是说浓度应该不变了吧?能维持活性多久呢?

另外,听说4度的LB培养液中,大肠杆菌还是会缓慢增殖, 是吗?我就是怕它增殖,所以不想放在培养液中。如果在4度培养液中,是不是可以维持几周都保持活性?

谢谢!
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

★
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也就几个小时,放置时间长了大肠会死掉的
4楼2011-11-10 09:46:54
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查看全部 8 个回答

hopebiolqdhb

金虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
不知道,放在pbs里会死吧
培养基
2楼2011-11-09 13:34:15
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mingongren

新虫 (初入文坛)

谢谢楼上,期待有大牛解惑。。
3楼2011-11-10 03:05:03
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★ ★
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zhang8826857(金币+3): good 2011-11-10 11:43:25
scelab(MicEPI+1): 很好很强大 2011-11-10 18:14:17
1.  LB 培养的大肠杆菌用20%甘油冻存,几个月内活力一样。不信你可以涂平板看看。

LB培养基过夜培养(10-12hr,时间长了不好,菌体会死掉很多),然后同50%的甘油等体积混合,置于零下40-80℃保存。根据实验情况保存相同体积的甘油管。

用的时候拿出一支来做实验即可。

2. PBS缓冲液可以在4℃保存大肠杆菌24 hr内活力变化不大。
一周肯定死亡90%。
不信,你可以试验下,最后都自溶了。

3 .LB培养基在4摄氏度可以保存菌体较长时间。
其实,在你拿出来放到冰箱的一个小时内,菌体活力就变化很多了,大肠杆菌增殖很快,一般20-30分钟一代嘛。
长时间放置例如7天,活力不知道怎么变化,这要看你初始的菌体密度!


综上所述,你应该用甘油低温冻存菌体。

[ Last edited by HarveyWang on 2011-11-10 at 11:16 ]
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2011-11-10 11:11:37
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