应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物胞内物质与胞外代谢产物提取
51/1返回列表
查看: 4502  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

[求助] 微生物胞内物质与胞外代谢产物提取

我要提取微生物胞内和胞外代谢产物，要去除杂蛋白质和菌体等，离心沉淀后，
1、上清液我加入草酸沉淀，后面加入丙酮溶解后离心去沉淀，请问丙酮我怎么去除呢？
2、对于胞内蛋白，我加入无水乙醇超声波破碎，后面离心去除沉淀，可是我的上清液中有无水乙醇，请问用什么方法可以把无水乙醇去除呢？

补充：1、我试验样品很少，就只有小几ml这样
      2、我们实验室只有真空泵，没有旋转蒸发仪和吹氮仪
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

超级SCI-精英良言-精美PPT汇总 微生物及其实验、理论、工具和书籍的东东 微生物燃料电池 科研经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
共同学习，一起进步
1楼 2011-11-07 12:03:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 547star at 2011-11-07 15:40:51:
楼上的够详细。回楼主，如果干了，溶剂应该都去掉了。如果样品来得容易，可以拿些60-80°C烘干，看看恒重的跟干燥器的差别。也可以测分光光度曲线，用溶剂做对照，大致比较。

好的~~谢谢你哈 我去实验下
赞一下 回复此楼
共同学习，一起进步
9楼2011-11-07 15:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励积极回帖交流 2011-11-07 13:07:55
放可以带抽真空嘴的干燥器中自然挥发干燥（放烘干的硅胶）或辅助抽真空干燥。
赞一下(1人) 回复此楼
为什么
2楼2011-11-07 13:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2011-11-07 13:02:19:
放可以带抽真空嘴的干燥器中自然挥发干燥（放烘干的硅胶）或辅助抽真空干燥。

那我怎么判断溶剂是否蒸发完全呢？
赞一下 回复此楼
共同学习，一起进步
3楼2011-11-07 13:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): good，看lz的反馈，lz反馈好可以向版主申请个EPI啊^_^ 2011-11-07 14:14:07
H-xiangzhu(金币+1): 2011-11-07 15:23:40
1.我一般就是放在通风橱几个小时，丙酮很快就挥发完了。剩余的主要是水分溶液。
乙醇的较难挥发，几个小时后放在40摄氏度的抽真空的恒温箱中，大约一个小时可以抽完剩余水分。

2.注意事项！
这时候要注意，你到底是测什么？！！
例如你要是测定发酵液的乙酸，肯定是要再抽之前加6M NaOH少许，将溶液变碱。因为在酸性条件下，乙酸在最后快抽干的时候要挥发的!

3.无论是丙酮还是乙醇，除蛋白的效果走不足以立即上液相柱子。其中会有不少的蛋白残留。即使是使用80%以上的乙醇。不信，你可以拿BSA蛋白做下测试，看看跟三氯乙酸相比，能不能有多少蛋白沉淀。

但是，这一步中有一个很好的去处蛋白的方法。就是最后的干燥抽真空步骤。当接近干燥的时候，所有的细胞蛋白都回变性沉淀的！

就是说，对于干燥抽干的样品，你只要用水溶液溶解，然后10000 rpm离心5-10分钟，上清中就几乎没有蛋白了。

细胞蛋白都回变成一团沉在管子的底部。上清你可以直接上样过柱子。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

H-xiangzhu
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2011-11-07 14:10:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +15 花田半亩～白 2026-04-21 15/750 2026-04-23 00:09 by prepg
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +5 yexuqing 2026-04-19 5/250 2026-04-22 10:01 by easeheart
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭