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mahoumeimei

金虫 (小有名气)

[求助] 高保真酶PCR

求教:为什么用高保真酶PCR时,经常P不出来?我知道高保真酶的扩增效率比普通Taq要差很多,可是明明前一次能P出来,再做一次就P不出来了。换模板,换引物,换dNTP,但是结果反复不定,我都快要崩溃了。用的是生工的pfu酶,本来想是不是酶的问题,想换宝生物的Ex Taq,结果有师兄用Ex Taq也经常P不出来。我们俩是同样的样品,用的兼并引物。请问有谁遇到过类似的问题吗?
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