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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂培养基凝固问题

我想问一下,我配的固体培养基100ml加了2g琼脂,在90度下进行间歇灭菌,发现冷了后琼脂不凝固,什么原因啊?
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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-11-03 07:56:40
下面是我整理的其他人的意见,是有关琼脂不凝固的,看看大家的说法对你有帮助没?看完之后基本上能解决你的问题^_^
甲:首先,加热溶解加入琼脂后调pH了吗?pH过低会导致培养基不凝固
其次,会不会是琼脂用量问题,你可以增加些用量
第三,琼脂的质量问题,琼脂条在使用时添加量要稍微高一点,琼脂粉是不是新买的
第四,培养基没有加热溶解够不够,就没有凝固。
第五,是不是琼脂加错了,营养琼脂不会凝固。
根据你的情况前三点可能性比较大
乙:1、琼脂加的不够
2、PH值过低
3、温度过高或加热时间过长
我们也有过培养基不凝固的现象,不过调过pH后也不见效。后来发现是使用的琼脂质量不好的原因。改用纯度高的琼脂粉后凝固效果明显。
丙:培养基的凝固性能与以下有关凝固剂质量/使用比例/PH/灭菌温度与持续时间有关.
丁:1,ph值不准确,偏酸 2,消毒时间过长,破坏了琼脂的凝固质 3,琼脂质量的问题 4,消毒后若还是长时间放在高温地方同样不凝固(比较小有这种情况) 5,单位容量的比例值,依琼脂的质量而言是每升用6.2-6.8克不等
戊:1、培养基PH值过低
2、所加琼脂量不够
3、琼脂质量不过关
4、灭菌时间过长
好孩子!
3楼2011-11-03 03:50:03
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流,有可能是这个原因,lz可以考虑下换换琼脂 2011-11-03 03:43:15
1.琼脂质量不行
2.培养基偏酸
2楼2011-11-03 00:19:11
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhang8826857 at 2011-11-03 03:50:03:
下面是我整理的其他人的意见,是有关琼脂不凝固的,看看大家的说法对你有帮助没?看完之后基本上能解决你的问题^_^
甲:首先,加热溶解加入琼脂后调pH了吗?pH过低会导致培养基不凝固
其次,会不会是琼脂用量问 ...

PH过低指的是低到多少?我用的是土豆葡萄糖培养基,自然PH
只要努力,总会有结果的
4楼2011-11-03 13:04:21
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-11-03 00:19:11:
1.琼脂质量不行
2.培养基偏酸

PH过低指的是低到多少?我用的是土豆葡萄糖培养基,自然PH
只要努力,总会有结果的
5楼2011-11-03 13:04:35
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 有可能的,有时候可能认错了,呵呵 2011-11-04 11:38:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by 秦川萝卜头 at 2011-11-03 13:04:35:
PH过低指的是低到多少?我用的是土豆葡萄糖培养基,自然PH

琼脂已加2g,量已经不少了,,所以推测应该是琼脂质量有问题
6楼2011-11-03 17:19:59
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loganfan

银虫 (正式写手)

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★
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-04 11:39:22
琼脂指的是琼脂粉,有时候容易和琼脂糖混,2g加量足够了
7楼2011-11-03 18:28:19
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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 土豆质量影响大吗 2011-11-04 11:39:41
以前也做过,发现有时候土豆的质量也会影响的
8楼2011-11-04 10:43:58
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kissyls

金虫 (正式写手)

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★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-04 16:17:37
秦川萝卜头(金币+5): 2011-11-05 10:28:13
100ml你加了2g琼脂,按道理来说2%足够了,你做的是PDA培养基,我以前也做过,琼脂1.8%都可以凝固,你看看你的琼脂吧,这个质量差别很大的,估计你的不是太好,看下凝胶强度,这个是区分琼脂好坏一个点.
我像只鱼儿在你的荷塘,只为和你守候那皎白月光.游过了四季荷花依然香,等你宛在水中央.
9楼2011-11-04 11:57:08
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慈铠戟_

银虫 (小有名气)

MS培养基吗???建议多加点琼脂进去,不然灭菌后容易不凝。
要是PH的话就调到7.0-7.2吧
10楼2011-11-24 17:20:05
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