| 查看: 3802 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
CTAB 基因提取方法的问题
|
|||
|
最近学习提取昆虫基因组（用的是蛴螬），采用CATB法，从文献上找的CTAB提取液配方，如下 0.1M Tris-HCl/ 0.02M EDTA/ 1.4M NaCl/ 0.2% β-巯基乙醇/ 0.05M CTAB 液氮研磨，苯酚氯仿抽提，冷异丙醇沉淀 头一次做使用的 华北大黑鳃金龟和 铜绿丽金龟幼虫，提取效果挺好，做PCR条带也很清晰，可是过了一周之后又做了一次（换做暗黑鳃金龟和黄褐丽金龟幼虫），虽然提取效果也不错，但是PCR却再也P不出东西来了  ，四种昆虫基因组提取结果如图所示（前两个能PCR出条带，后两个P不出来）。这个问题是CTAB提取的问题么？PCR应该不会出现问题，引物设计和程序一类都没问题，我觉得问题可能会出现在提取液上面。 CTAB配制完后我一直都是 室温保存，因为放4℃感觉是完全析出。。这个提取液需要现用现配吗？使用之前不温浴溶解对提取影响大吗？确实第二次做的时候没有温浴，因为我看只有少量白色絮状析出，而且研磨之后要65℃水浴1个小时，所以觉得提前温浴没有什么必要吧。。。 各位大侠能看出来这是哪里出现了问题吗？或是有哪位同学以前也出现过这种问题？是如何解决的啊？  从左到右 分别是 大黑，铜绿，暗黑，黄褐 前两个P出了结果，后两个P不出来了 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有284人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- 在DNA提取过程中遇到了困惑，希望朋友们可以解答一下,提DNA 的高手请进！！！
已经有15人回复
- CTAB提取细菌DNA
已经有15人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】CTAB 法提取DNA，克隆基因全长？
已经有7人回复
- 【求助/交流】CTAB法提取了dna，帮我看看图片，帮忙提点改进方法
已经有20人回复
- 【求助/交流】急！！CTAB提取液4度保存，有白色絮状物，可以用来直接提取植物DNA吗？
已经有4人回复
- 【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
已经有11人回复
- 【求助/交流】植物基因组DNA提取（CTAB法）
已经有7人回复
5楼2011-11-03 08:24:42
2楼2011-11-02 19:48:29
3楼2011-11-02 19:51:01
4楼2011-11-02 21:37:48
28