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陌陌22默默

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我看看这个RNA胶图,这是神马情况。。。

这是我提的RNA胶图,用一般的TAE跑的,godview直接加在胶里的,100V跑了30min.不知道是什么原因,一半亮,一般黑。不知道RNA是降解了,还是电泳的问题,还是跑的时间太长啦。。谁能告诉我这是为什么吗?按理说RNA在提取的时候应该不会有问题,我想不通问题出在哪儿?谁能帮我看看问题出在哪儿,我将十分感激。。。O(∩_∩)O谢谢。。。



[ Last edited by wanhscn on 2011-11-2 at 14:05 ]
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慢就是快
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cike0537

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我一般150V15min ,TAE也是DEPC水做的
2楼2011-11-01 22:52:22
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助!热心! 2011-11-02 14:06:24
看了看,胶很干净,应该不会单纯是降解了,光是降解的话,好歹能见到弥散。首先,建议跑完胶,再泡入染料里染胶;其次,跑电泳100v,10min就看一下大体就有个数了,觉得没跑太远,可以再跑上个几分钟,上来就整30min有点多;第三,胶下方的黑条带是你loading buffer里面的染料,不需要管它;最后,建议以后把图截一下,然后用jpg格式,这样比较方便大家下载或者在线看……
3楼2011-11-02 09:20:49
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

西瓜: 何以见得?从maker看出来的? 2011-11-06 21:58:37
内容已删除
4楼2011-11-06 18:23:59
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-06 21:58:45
怎么一点条带也没有,不会是没提出来吧,或者操作过程中搞错了,建议重新在提一次
风雪夜归人
5楼2011-11-06 18:59:37
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 手机党不容易啊。这种现象是核酸染料在电泳时向负极移动造成的啦,正常现象。 2011-11-07 16:54:51
引用回帖:
: Originally posted by 晓风残月cl at 2011-11-06 18:23:59:
应该是胶没融好  我也遇到过这种图片
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

我前几天有张照片是下方全黑的  而上方很白  后来分析有几个可能 1胶没融好 2goldview量太少 而胶太厚 照相时有影响 3软件多调一调,亮度什么的
希望能对你有用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2011-11-07 00:37:40
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madengyu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2011-11-07 10:48:32
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

gyesang: 回帖置顶 2014-08-21 15:50:41
和EB一样,GoldView电泳时会向负极移动(胶孔方向),所以电泳之后,靠近胶孔那边的背景会更亮,而另一半的胶背景会比较暗,这个是正常现象,不影响结果的。
8楼2011-11-07 16:53:41
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wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

怎么都没有看到你的RNA的呢?我在做的时候也出现过好几次这样子的情况,不过只要出来结果了是不碍事的吧,但是关键的是,怎么都没有看到你的RNA呢?还有融胶的时候匀了的话应该会比较好些~
乱花渐欲迷人眼
9楼2012-05-08 20:59:15
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