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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮我看看这个RNA胶图，这是神马情况。。。
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陌陌22默默

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我看看这个RNA胶图，这是神马情况。。。

这是我提的RNA胶图，用一般的TAE跑的，godview直接加在胶里的，100V跑了30min.不知道是什么原因，一半亮，一般黑。不知道RNA是降解了，还是电泳的问题,还是跑的时间太长啦。。谁能告诉我这是为什么吗？按理说RNA在提取的时候应该不会有问题，我想不通问题出在哪儿？谁能帮我看看问题出在哪儿，我将十分感激。。。O(∩_∩)O谢谢。。。



[ Last edited by wanhscn on 2011-11-2 at 14:05 ]
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慢就是快
1楼 2011-11-01 21:52:26
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cike0537

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我一般150V15min ,TAE也是DEPC水做的
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2楼2011-11-01 22:52:22
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！热心！ 2011-11-02 14:06:24
看了看，胶很干净，应该不会单纯是降解了，光是降解的话，好歹能见到弥散。首先，建议跑完胶，再泡入染料里染胶；其次，跑电泳100v，10min就看一下大体就有个数了，觉得没跑太远，可以再跑上个几分钟，上来就整30min有点多；第三，胶下方的黑条带是你loading buffer里面的染料，不需要管它；最后，建议以后把图截一下，然后用jpg格式，这样比较方便大家下载或者在线看……
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3楼2011-11-02 09:20:49
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

西瓜: 何以见得？从maker看出来的？ 2011-11-06 21:58:37
内容已删除
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4楼2011-11-06 18:23:59
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-06 21:58:45
怎么一点条带也没有，不会是没提出来吧，或者操作过程中搞错了，建议重新在提一次
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风雪夜归人
5楼2011-11-06 18:59:37
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晓风残月cl

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 手机党不容易啊。这种现象是核酸染料在电泳时向负极移动造成的啦，正常现象。 2011-11-07 16:54:51
引用回帖:
楼: Originally posted by 晓风残月cl at 2011-11-06 18:23:59:
应该是胶没融好  我也遇到过这种图片
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

我前几天有张照片是下方全黑的  而上方很白  后来分析有几个可能 1胶没融好 2goldview量太少 而胶太厚 照相时有影响 3软件多调一调，亮度什么的
希望能对你有用

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2011-11-07 00:37:40
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madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
7楼2011-11-07 10:48:32
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

gyesang: 回帖置顶 2014-08-21 15:50:41
和EB一样，GoldView电泳时会向负极移动（胶孔方向），所以电泳之后，靠近胶孔那边的背景会更亮，而另一半的胶背景会比较暗，这个是正常现象，不影响结果的。
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8楼2011-11-07 16:53:41
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wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

怎么都没有看到你的RNA的呢?我在做的时候也出现过好几次这样子的情况,不过只要出来结果了是不碍事的吧,但是关键的是,怎么都没有看到你的RNA呢?还有融胶的时候匀了的话应该会比较好些~
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乱花渐欲迷人眼
9楼2012-05-08 20:59:15
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