应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 破碎细胞的各种方法
101/1返回列表
查看: 3261  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

光2012

新虫 (初入文坛)

[求助] 破碎细胞的各种方法

本人欲测定胞内代谢的有机酸，但是由于能力所限，找不到相关的文献和资料参考，主要需要破碎细胞的各类详细方法，望各位虫友指教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-01 17:37:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光2012

新虫 (初入文坛)
错了，是胞内有机酸
赞一下 回复此楼
2楼2011-11-01 17:38:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流！ 2011-11-01 19:49:21
超声
弱去污剂
强去污剂
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-01 17:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虚灵子

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 鼓励交流~ 2011-11-02 09:45:23
光2012(金币+2): 我需要有机酸细胞破碎方面的资料，不过，还是谢谢啦 2011-11-02 10:44:35
机械法：
（1）研磨法（2）组织捣碎器捣碎法
物理法：
（1）反复冻融法（2）超声波处理法（3）压榨法（4）冷热交替法
化学与生物化学法：
（1）自溶法（2）溶胀法（3）酶解法（4）有机溶剂处理法
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-11-01 20:16:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乘风浮云

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

光2012(金币+5): 2011-11-03 09:59:39
我破碎细胞用的是溶菌酶和超声波细胞破碎仪结合使用的方法破碎菌体。溶菌酶的添加量为0.1 g/100 mL菌悬液，待溶菌酶完全溶解后，置于35℃摇床培养箱160 r/min 破除细胞壁2 h。然后，使用超声波细胞破碎仪辅助破碎菌体，其工作参数为：功率600 w，超声时间5 min，工作2 s，间歇2 s，同时菌悬液要冰浴，以免温度过高，影响酶的活性。采用革兰氏染色法检测菌体是否破碎。这要看你是什么菌体啦，要是真核细胞，应该更好破碎的！最近看的一篇英文文献，是菌悬液冻融后，等体积TEA缓冲液稀释，在4度下用French pressure cell 下破碎的，压力位60MPa。多找找应该可以找到的，实在找不到直接相关的步骤，就用别人的一些方法，尝试看看用在自己试验中验证下可不可行。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-11-02 11:00:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励 2011-11-09 17:04:34
细胞的用ripa裂解试试看
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-11-02 14:43:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

touniu2010

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励 2011-11-09 17:04:24
我做酵母，破的时候用直径为100微米的玻璃粉在振荡器上震
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-11-03 17:09:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaozi9876

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
看天(金币+2): 鼓励 2011-11-09 17:04:41
1.如果是gram-negative，则使用solvents或是detergents，比较容易。
2.如果是gram-positive，则使用lysozyme，再借助物理方法，如sonication或加入稳定性颗粒进行vibration。

反正注意点就是不要破坏胞内有机酸就行
赞一下(1人) 回复此楼
Onceinamoment,wethinkoneselfgrowup,oneday,wefinallyfound...
8楼2011-11-04 17:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baodongq

禁虫 (正式写手)
光2012(金币+3): 2011-11-09 16:41:08
本帖内容被屏蔽
9楼2011-11-09 13:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

程xz777

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 乘风浮云 at 2011-11-02 11:00:35
我破碎细胞用的是溶菌酶和超声波细胞破碎仪结合使用的方法破碎菌体。溶菌酶的添加量为0.1 g/100 mL菌悬液，待溶菌酶完全溶解后，置于35℃摇床培养箱160 r/min 破除细胞壁2 h。然后，使用超声波细胞破碎仪辅助破碎菌 ...

您好，我最近要做单细胞藻的破壁，请问您上述的方法能用与藻的破壁吗？请教，期待回复。
赞一下 回复此楼
10楼2019-09-01 20:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 光2012 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 10/500 2026-08-22 23:42 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭