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汕头大学海洋科学接受调剂
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yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 绿色荧光的观察

看文献上有人说:菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下看到。
我想问一下各位:
1、紫外灯就是平时操作台上的紫外灯就可以吗??还是说需要特定波长的紫外灯,比如480nm的??
2、紫外灯照射30s的话应该对菌体没有什么特别的影响吧?照射背景选择黑色的吧??
3、GFP标记的菌株如果在紫外灯下没有看到荧光的话,是不是就能肯定真的没有发荧光了啊??
4、紫外灯下观察菌体发荧光的时候,需要在平板上培养多长的时间才能观察得到??
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yesucao(金币+18): 2 2011-11-01 08:50:02
wanhscn(金币-14): 楼主反馈:本来是发2个金币,扣14金币,总共发4个金币,谢谢理解! 2011-11-01 08:56:11
wanhscn(金币+5): 鼓励专家应助回帖,谢谢! 2011-11-01 08:59:34
引用回帖:
1楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-31 09:26:12:
看文献上有人说:菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下看到。
我想问一下各位:
1、紫外灯就是平时操作台上的紫外灯就可以吗??还是说需要特定波长的紫外灯,比如480nm的??
2、紫外灯照射30s的话应该对菌体 ...

480nm 是可见光,紫外灯激发的是395nm的那个激发峰
不让吃就去死
3楼2011-10-31 17:39:03
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xiemin217

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流! 2011-10-31 18:26:21
yesucao(金币+2): 谢谢回复 2011-11-01 08:49:32
GFP可以用紫外激光看肯定没有问题,但是对活体细胞有杀伤。
菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下我没有做过,不清楚,要看看到荧光你还需要考虑光能不能进去,还有荧光能不能出来。
简单的办法就是直接试试,这个很容易做到。
2楼2011-10-31 16:48:29
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-11-01 09:04:35
菌体表达蛋白的话直接日光就能看见吧   为什么是在平板上观察  平板上能表达出蛋白吗
hold住
4楼2011-10-31 18:58:27
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yesucao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zc10052157 at 2011-10-31 18:58:27:
菌体表达蛋白的话直接日光就能看见吧   为什么是在平板上观察  平板上能表达出蛋白吗

,我需要看到绿色荧光啊,现在日光下   平板上的菌体看不到绿色的
5楼2011-10-31 20:26:37
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