| 查看: 3581 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
shushen_jian
|
[求助]
实验液相色谱遇到了问题，请大家帮忙！！！
|
|
|
各位虫友好： 我做的实验是苯和苯酐合成蒽醌，反应式如下 分析条件如下： 检测器：多波长紫外检测器 色谱柱：反相C18 流动相：甲醇：水=80：20，加柠檬酸调至PH=3 分析波长：257nm（根据文献报道，不知是否正确？） 1.刚开始根据文献上的报道我是用1，4-二氧六环来溶解蒽醌和苯酐混合物的（其中蒽醌和苯酐都是纯的物质），但是发现不知为什么如果单是进溶剂1，4-二氧六环它本身也会出峰（见色谱图1），从而导致出峰很乱，为什么溶剂1，4-二氧六环会出峰呢？ 2.后来我试着用甲醇来溶解纯的蒽醌（蒽醌称的是0.0025g用甲醇溶于25ml容量瓶中，浓度是0.1mg/ml），发现峰型很好（见色谱图2）； 3.然后我就用甲醇来溶解蒽醌和苯酐的混合物，混合物中苯酐和蒽醌的质量是称的都是0.0012g,然后用甲醇溶于25ml的容量瓶中，发现出的峰（见色谱图3），可以看到蒽醌的响应因子在140-150mA，苯酐的响应因子只有10-20mA，我想问的是苯酐和蒽醌的质量之比是1：1，而它们的峰面积之比是不是也应该是1：1？另外保留时间在2.439min的峰是不是就是苯酐呢？ 4.色谱图4代表的是单进苯酐的峰，苯酐是在这个时间出峰吗？ 5.另外流动相中水不加柠檬酸时，出来的峰型也差不多，我想问的是这里的柠檬酸主要有什么用？ 希望大家畅所欲言给与帮助，在此先谢过了，谢谢大家！！！      |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
qinnan» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
-
29号明天会评吗
已经有4人回复
-
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有10人回复
-
梦想
已经有4人回复
-
中青基了要发朋友圈吗？
已经有6人回复
-
基金不中，共勉
已经有12人回复
-
能否申诉？
已经有7人回复
-
面上意见出来了
已经有19人回复
-
为什么到现在没收到通知？
已经有5人回复
-
有没有仍没收到信息的
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 高效液相色谱测试问题
已经有3人回复
- 液相色谱检测 出峰遇到问题了。怎么办？？
已经有12人回复
- 哪位虫友可以帮我试个液相条件
已经有13人回复
- 液相色谱分析 样品分离遇到问题了？怎么办才好？？
已经有4人回复
- 液相色谱测试物质 发现出峰问题。谢谢大家了。
已经有9人回复
- 液相色谱 含量测定 遇到一些问题了。怎么办才好？？
已经有3人回复
- 大家高效液相使用完后都是怎么冲柱子的？
已经有48人回复
- 药动学实验血样HPLC出现鬼峰，求帮忙，谢谢！！！
已经有10人回复
- 我有几道液相色谱的思考题，请大家帮帮忙~~~~(>_<)~~~~
已经有6人回复
- 【资源】经典：高效液相色谱实验技术问题解答
已经有24人回复
- 【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题
已经有24人回复
- 【交流】【有奖参与】来分析版的虫友，请大家介绍一下自己的研究方向^_^
已经有61人回复
shushen_jian 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 532.7
- 散金: 70
- 红花: 2
- 帖子: 330
- 在线: 95.6小时
- 虫号: 1126467
- 注册: 2010-10-19
- 性别: GG
- 专业: 应用有机化学
3楼2011-10-31 13:44:39
ltxin2009
铁杆木虫 (职业作家)
- ACI: 1
- 应助: 157 (高中生)
- 贵宾: 0.368
- 金币: 6510.3
- 散金: 1025
- 红花: 29
- 沙发: 1
- 帖子: 3711
- 在线: 1610.3小时
- 虫号: 1100553
- 注册: 2010-09-16
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
2楼2011-10-31 11:42:01
ltxin2009
铁杆木虫 (职业作家)
- ACI: 1
- 应助: 157 (高中生)
- 贵宾: 0.368
- 金币: 6510.3
- 散金: 1025
- 红花: 29
- 沙发: 1
- 帖子: 3711
- 在线: 1610.3小时
- 虫号: 1100553
- 注册: 2010-09-16
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
4楼2011-10-31 13:55:40
liangjinhuan
金虫 (小有名气)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 1326.3
- 红花: 2
- 帖子: 145
- 在线: 22.1小时
- 虫号: 514981
- 注册: 2008-02-29
- 专业: 药物分析
【答案】应助回帖
shushen_jian(金币+10): 2011-11-01 08:15:12
|
1.1，4-二氧六环出峰也是可能的。说明1，4-二氧六环或者其含有的杂质在该波长下是有吸收的。而且出的杂峰比较多。应该不适宜作为本方法的溶剂。 2.因为本身流动相中含有甲醇，而且甲醇在250nm以后的吸收很小。如果待测物质在甲醇中稳定的话，建议用甲醇来溶解，或者流动相能溶解的话用流动相来溶解。这样可以有效消除溶剂峰。 3.应该是蒽醌和苯酐在波长下的吸收系数不一样，也就是它们在该紫外波长257的响应值是不一样。具体可以取两种物质进行紫外扫描来判定。这个也是检测复合样品中普遍存在的现象。 4.在此条件下再进一针溶剂，如果不是溶剂峰的话。那就可以判定2.4min左右的峰是苯酐的色谱峰。 5.柠檬酸的作用，这个没做过这种化合物的不太好说，不过一般流动相调节PH的话，基本都是为了调节峰型或者相邻杂质的分离度，还有就是为了保持样品和色谱体系的稳定性。 希望以上回答能对你有一定得帮助。 |
5楼2011-10-31 14:03:08
30