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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于Cre基因的鉴定
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wl03

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于Cre基因的鉴定

在鉴定Cre基因
合成了5对引物，包括Jackson Lab 和文献上的，
但是在鉴定的过程发现，阴性对照组，即 已知的 wild type鼠也有同样大小的PCR产物，
我现在计划将两个产物都送去测序以验证ＷＴ中的PCR产物是啥！
但是单纯的就这个问题该怎么解决？
谢谢大家！
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。。。
1楼2011-10-30 20:18:30
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
鉴定Cre敲除的基因吧，是吗？
基因敲出鼠，减尾巴来的。。。。。。。
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2011-10-31 08:52:59
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wl03

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 08:52:59:
鉴定Cre敲除的基因吧，是吗？
基因敲出鼠，减尾巴来的。。。。。。。

是提基因组鉴定
但是发现引物在positive 和 negative Control里面都有产物！
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。。。
3楼2011-10-31 10:15:08
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
negative Control里面都有产物

引物污染了吧
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2011-10-31 10:18:15
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wl03

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 10:18:15:
negative Control里面都有产物

引物污染了吧

我觉得不会 ！
因为我的引物是新合成的！
并且同时合成了3对！
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。。。
5楼2011-10-31 11:08:37
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
那negative Control 不应该有啊

不是只加引物不加模版的那种吗？
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6楼2011-10-31 15:04:23
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wl03

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 15:04:23:
那negative Control 不应该有啊

不是只加引物不加模版的那种吗？

这个不是
这个Control 是wt鼠，就是没有cre表达的鼠，您说的这个Control我也有加，它是没有产物的！
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。。。
7楼2011-10-31 17:57:03
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
那也不应该有吧！
阳性阴性条带是一样的吗？

我们这的，举例说有的wt一条带 m的2条带
                    有的WT 是2条带  m是3条带
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
8楼2011-10-31 19:34:07
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wl03

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 19:34:07:
那也不应该有吧！
阳性阴性条带是一样的吗？

我们这的，举例说有的wt一条带 m的2条带
                    有的WT 是2条带  m是3条带

我这里是有和无的关系
阳性的就是有
阴性的就是没有
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。。。
9楼2011-10-31 21:55:22
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
对啊，应该没有，但现在有了
那应该是引物的问题啊，重新容一个新的试试

或者PCR条件不够好，容易起非特异，优化下巴
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10楼2011-11-01 09:11:39
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