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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wl03

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于Cre基因的鉴定

在鉴定Cre基因
合成了5对引物,包括Jackson Lab 和文献上的,
但是在鉴定的过程发现,阴性对照组,即 已知的 wild type鼠也有同样大小的PCR产物,
我现在计划将两个产物都送去测序以验证WT中的PCR产物是啥!
但是单纯的就这个问题该怎么解决?
谢谢大家!
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。。。
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

鉴定Cre敲除的基因吧,是吗?
基因敲出鼠,减尾巴来的。。。。。。。
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2011-10-31 08:52:59
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wl03

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 08:52:59:
鉴定Cre敲除的基因吧,是吗?
基因敲出鼠,减尾巴来的。。。。。。。

是提基因组鉴定
但是发现引物在positive 和 negative Control里面都有产物!
。。。
3楼2011-10-31 10:15:08
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

negative Control里面都有产物

引物污染了吧
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
4楼2011-10-31 10:18:15
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wl03

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 10:18:15:
negative Control里面都有产物

引物污染了吧

我觉得不会 !
因为我的引物是新合成的!
并且同时合成了3对!
。。。
5楼2011-10-31 11:08:37
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

那negative Control 不应该有啊

不是只加引物不加模版的那种吗?
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
6楼2011-10-31 15:04:23
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wl03

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 15:04:23:
那negative Control 不应该有啊

不是只加引物不加模版的那种吗?

这个不是
这个Control 是wt鼠,就是没有cre表达的鼠,您说的这个Control我也有加,它是没有产物的!
。。。
7楼2011-10-31 17:57:03
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

那也不应该有吧!
阳性阴性条带是一样的吗?

我们这的,举例说有的wt一条带 m的2条带
                    有的WT 是2条带  m是3条带
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
8楼2011-10-31 19:34:07
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wl03

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 19:34:07:
那也不应该有吧!
阳性阴性条带是一样的吗?

我们这的,举例说有的wt一条带 m的2条带
                    有的WT 是2条带  m是3条带

我这里是有和无的关系
阳性的就是有
阴性的就是没有
。。。
9楼2011-10-31 21:55:22
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

对啊,应该没有,但现在有了
那应该是引物的问题啊,重新容一个新的试试

或者PCR条件不够好,容易起非特异,优化下巴
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
10楼2011-11-01 09:11:39
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