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银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wl03(金币+10): 你说的很对! 我那么做了,新订的WT鼠专门用来做阴性对照,结果还是那样,现在正准备把PCR结果送测序!! 2011-11-01 10:36:13
为什么不怀疑阴性组的问题。
既然你的引物出处很权威,又有多对引物,结果又一致。
那结果为真的可能性很大。
你的阴性对照组有问题。
1.能否确认你的阴性组的来源?鉴定确为合格的WT。
2.实验室或者周围有用到你这种WT鼠吗?借一只,提个DNA,再P次。
实验嘛,总会出各种奇怪的问题,设计实验一 一排除可能就好。
11楼2011-11-01 09:29:25
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日上主

新虫 (初入文坛)

我最近也碰到非常奇怪的现象就是7天剪尾的小鼠pcr鉴定一次,等到这个小鼠长到3个月的时候,脱颈处死时在剪尾鉴定一次,居然发现不一致,就是原来有cre,3个月的时候就没有,错误发生率大概有50%,请问怎么回事啊?假阳性?期待你的回复!
12楼2015-01-18 21:20:47
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Lucky-pine

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by telomerase at 2011-11-01 09:11:39
对啊,应该没有,但现在有了
那应该是引物的问题啊,重新容一个新的试试

或者PCR条件不够好,容易起非特异,优化下巴

我想请问下,我的阴性对照是不加模板,所有试剂都换新的,可是cre 阴性对照还是做出了条带,这是怎么回事?
人生不可重来,所以只要好好生活,不要失望,每天都是新的希望。
13楼2015-07-04 10:41:46
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hqx999

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by Lucky-pine at 2015-07-04 10:41:46
我想请问下,我的阴性对照是不加模板,所有试剂都换新的,可是cre 阴性对照还是做出了条带,这是怎么回事?...

你好,我也有同样的问题,阴性对照也做出了条件,你的问题解决了吗
新的开始,新的起点!加油!
14楼2015-07-24 04:41:33
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Lucky-pine

银虫 (初入文坛)

我的cre目的条带位置在100左右,阴性对照是不加模板,加的是等体积的高压超纯水,而且酶,引物,dNTP都用新的可是阴性对照还是P出来了,这是什么原因。
人生不可重来,所以只要好好生活,不要失望,每天都是新的希望。
15楼2015-11-27 21:56:54
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superkelly

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by hqx999 at 2015-07-24 04:41:33
你好,我也有同样的问题,阴性对照也做出了条件,你的问题解决了吗...

你好你好~~ 请问你解决了吗? 我也有同样的疑惑   求交流
16楼2016-10-08 22:08:19
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moliya-

新虫 (初入文坛)

请问问题解决了吗?我也遇到了一样的问题

发自小木虫IOS客户端
17楼2021-09-26 09:55:39
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