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wl03

铜虫 (正式写手)

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[求助] 关于Cre基因的鉴定

在鉴定Cre基因
合成了5对引物，包括Jackson Lab 和文献上的，
但是在鉴定的过程发现，阴性对照组，即已知的 wild type鼠也有同样大小的PCR产物，
我现在计划将两个产物都送去测序以验证ＷＴ中的PCR产物是啥！
但是单纯的就这个问题该怎么解决？
谢谢大家！

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。。。

1楼 2011-10-30 20:18:30

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银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

wl03(金币+10): 你说的很对！我那么做了，新订的WT鼠专门用来做阴性对照，结果还是那样，现在正准备把PCR结果送测序！！ 2011-11-01 10:36:13

为什么不怀疑阴性组的问题。
既然你的引物出处很权威，又有多对引物，结果又一致。
那结果为真的可能性很大。
你的阴性对照组有问题。
1.能否确认你的阴性组的来源？鉴定确为合格的WT。
2.实验室或者周围有用到你这种WT鼠吗？借一只，提个DNA，再P次。
实验嘛，总会出各种奇怪的问题，设计实验一一排除可能就好。