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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于Cre基因的鉴定
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wl03

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于Cre基因的鉴定

在鉴定Cre基因
合成了5对引物，包括Jackson Lab 和文献上的，
但是在鉴定的过程发现，阴性对照组，即 已知的 wild type鼠也有同样大小的PCR产物，
我现在计划将两个产物都送去测序以验证ＷＴ中的PCR产物是啥！
但是单纯的就这个问题该怎么解决？
谢谢大家！
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。。。
1楼 2011-10-30 20:18:30
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adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wl03(金币+10): 你说的很对！ 我那么做了，新订的WT鼠专门用来做阴性对照，结果还是那样，现在正准备把PCR结果送测序！！ 2011-11-01 10:36:13
为什么不怀疑阴性组的问题。
既然你的引物出处很权威，又有多对引物，结果又一致。
那结果为真的可能性很大。
你的阴性对照组有问题。
1.能否确认你的阴性组的来源？鉴定确为合格的WT。
2.实验室或者周围有用到你这种WT鼠吗？借一只，提个DNA，再P次。
实验嘛，总会出各种奇怪的问题，设计实验一 一排除可能就好。
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11楼2011-11-01 09:29:25
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
鉴定Cre敲除的基因吧，是吗？
基因敲出鼠，减尾巴来的。。。。。。。
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2011-10-31 08:52:59
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wl03

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2011-10-31 08:52:59:
鉴定Cre敲除的基因吧，是吗？
基因敲出鼠，减尾巴来的。。。。。。。

是提基因组鉴定
但是发现引物在positive 和 negative Control里面都有产物！
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。。。
3楼2011-10-31 10:15:08
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
negative Control里面都有产物

引物污染了吧
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2011-10-31 10:18:15
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