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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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luozhen2008

木虫 (正式写手)


[交流] 关于腺病毒包装的问题

最近要包装腺病毒,按照protocol上说转染后7到10天收集细胞,但是我的细胞转染后四天都漂了80%。转染的时候细胞汇合度大概50%左右,24h后更换过培养基,我用的25cm2的培养瓶。加了7ml的培养基。那个有经验的大哥能不能解释下。我是应该提前收细胞,还是等到5天以后,如果等到5天后病毒会不会释放到上清里面去了?
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lexiner82

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
是不是脂质体加多了哦 不要频繁的看细胞,晃来晃去的容易漂
2楼2011-11-28 16:29:32
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西山鱼

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
多几天没关系,我的经验是感染时间很重要,5-7天是必要的。上清一起纯化就是
4楼2012-02-18 11:49:34
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威尼斯

铁虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
我感觉你的细胞密度过低,转染后细胞容易死!
5楼2012-03-10 17:54:12
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CY.Force

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
我觉得等待五天是必须的,如果包装成功,病毒会释放到上清里!
6楼2013-12-23 16:55:07
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海的蓝色梦想

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
请问您找到转染4后细胞大量漂浮的原因了吗?怎么解决问题的呢?我现在遇到了同样的难题,求助!多谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-24 00:41:34
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海的蓝色梦想

新虫 (初入文坛)


万分感激,谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2015-01-24 00:42:56
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littlecale

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
1.细胞的状态问题(最主要的,293包腺病毒代数最重要,代数高的短时间就容易飘);
2.降低血清浓度;
3.用低毒性的转染试剂比如汉恒的LipoFiter,我试过还不错
来病毒包装QQ群一起讨论下:AAV 腺病毒慢病毒/转染 390425058
9楼2015-09-04 10:04:43
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Dorothy_汉恒

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
主要还是细胞状态的问题,考虑换一批细胞包装吧,另外不要频繁看细胞!用低毒的转染试剂(如我们公司研发的LipoFiter)很关键!lipo2000毒性实在太大 ,普通转染还行,包毒就算了吧。
10楼2015-09-11 07:47:49
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jora0418

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
哪位有腺病毒包装protocol呢  能不能给我邮箱发一份?419749423@qq.com   谢谢各位
11楼2015-11-14 16:23:06
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简单回复
clarktao3楼
2011-11-28 16:33   回复  
luozhen2008(金币+1):谢谢参与
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