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关于腺病毒包装的问题
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luozhen2008
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虫号: 518300
[交流]
关于腺病毒包装的问题
最近要包装腺病毒,按照protocol上说转染后7到10天收集细胞,但是我的细胞转染后四天都漂了80%。转染的时候细胞汇合度大概50%左右,24h后更换过培养基,我用的25cm2的培养瓶。加了7ml的培养基。那个有经验的大哥能不能解释下。我是应该提前收细胞,还是等到5天以后,如果等到5天后病毒会不会释放到上清里面去了?
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1楼
2011-10-29 20:34:31
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Dorothy_汉恒
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虫号: 4064248
★
luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
主要还是细胞状态的问题,考虑换一批细胞包装吧,另外不要频繁看细胞!用低毒的转染试剂(如我们公司研发的LipoFiter)很关键!lipo2000毒性实在太大 ,普通转染还行,包毒就算了吧。
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10楼
2015-09-11 07:47:49
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lexiner82
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虫号: 1513760
★
luozhen2008(金币
+1
):谢谢参与
是不是脂质体加多了哦 不要频繁的看细胞,晃来晃去的容易漂
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2楼
2011-11-28 16:29:32
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西山鱼
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虫号: 406810
★
luozhen2008(金币
+1
):谢谢参与
多几天没关系,我的经验是感染时间很重要,5-7天是必要的。上清一起纯化就是
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4楼
2012-02-18 11:49:34
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威尼斯
铁虫
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★
luozhen2008(金币
+1
):谢谢参与
我感觉你的细胞密度过低,转染后细胞容易死!
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5楼
2012-03-10 17:54:12
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