24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2332  |  回复: 10

luozhen2008

木虫 (正式写手)


[交流] 关于腺病毒包装的问题

最近要包装腺病毒,按照protocol上说转染后7到10天收集细胞,但是我的细胞转染后四天都漂了80%。转染的时候细胞汇合度大概50%左右,24h后更换过培养基,我用的25cm2的培养瓶。加了7ml的培养基。那个有经验的大哥能不能解释下。我是应该提前收细胞,还是等到5天以后,如果等到5天后病毒会不会释放到上清里面去了?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lexiner82

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
是不是脂质体加多了哦 不要频繁的看细胞,晃来晃去的容易漂
2楼2011-11-28 16:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西山鱼

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
多几天没关系,我的经验是感染时间很重要,5-7天是必要的。上清一起纯化就是
4楼2012-02-18 11:49:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

威尼斯

铁虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1):谢谢参与
我感觉你的细胞密度过低,转染后细胞容易死!
5楼2012-03-10 17:54:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CY.Force

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
我觉得等待五天是必须的,如果包装成功,病毒会释放到上清里!
6楼2013-12-23 16:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海的蓝色梦想

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
请问您找到转染4后细胞大量漂浮的原因了吗?怎么解决问题的呢?我现在遇到了同样的难题,求助!多谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-24 00:41:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海的蓝色梦想

新虫 (初入文坛)


万分感激,谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2015-01-24 00:42:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

littlecale

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
1.细胞的状态问题(最主要的,293包腺病毒代数最重要,代数高的短时间就容易飘);
2.降低血清浓度;
3.用低毒性的转染试剂比如汉恒的LipoFiter,我试过还不错
来病毒包装QQ群一起讨论下:AAV 腺病毒慢病毒/转染 390425058
9楼2015-09-04 10:04:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dorothy_汉恒

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
主要还是细胞状态的问题,考虑换一批细胞包装吧,另外不要频繁看细胞!用低毒的转染试剂(如我们公司研发的LipoFiter)很关键!lipo2000毒性实在太大 ,普通转染还行,包毒就算了吧。
10楼2015-09-11 07:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jora0418

新虫 (初入文坛)



luozhen2008(金币+1): 谢谢参与
哪位有腺病毒包装protocol呢  能不能给我邮箱发一份?419749423@qq.com   谢谢各位
11楼2015-11-14 16:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
clarktao3楼
2011-11-28 16:33   回复  
luozhen2008(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 luozhen2008 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 310求调剂 +13 666真好 2026-04-11 14/700 2026-04-12 16:48 by 1005715100
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 4/200 2026-04-12 16:32 by aheyingwhg
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +9 drizzle_9 2026-04-12 10/500 2026-04-12 14:51 by drizzle_9
[考研] 297求调剂 +17 ORCHID1 2026-04-10 18/900 2026-04-12 09:59 by zhouwenxian
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-06 8/400 2026-04-11 20:25 by 蓝云思雨
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 生物学调剂 +8 小冉要努力 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:22 by wwj2530616
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[基金申请] 有爆料,一个青年教师卖房得400万,然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 材料工程322 +18 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 19/950 2026-04-09 10:44 by cymywx
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 265求调剂 +19 小木虫085600 2026-04-06 21/1050 2026-04-08 10:38 by 逆水乘风
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见