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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 反转录高手进来~~
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沾欢欢

金虫 (正式写手)

啦啦啦

[求助] 反转录高手进来~~

我提的病毒RNA浓度大概是0.15 微克/微升,反转录用的酶是宝生的M-MLV反转录酶~反转录之后我直接取 1 微升cDNA进行PCR扩增(25微升体系),电泳显示的目标条带很亮,并且也没有引物二聚体.但是呢,我将cDNA稀释十倍以后再取1微升进行PCR扩增,结果全是引物二聚体,几乎看不见目标条带,这是为何?就稀释十倍居然有那么大的差别??
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1楼 2011-10-27 20:49:40
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 有道理! 2011-11-02 11:31:53
干嘛要稀释？？我做PCR的时候cDNA一般都加倍使用啊，模板少的话多余的引物就会结合在一起啊，你是要最后得到靶基因还是探索PCR的条件？？
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4楼2011-11-01 22:31:09
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