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shiliushu44

金虫 (小有名气)

[交流] 饲养细胞存活时间有多长

我们实验室，细胞融合之前一天制备饲养细胞，这样饲养细胞的作用比较好。但是，有时候实验进度没有把握好，饲养细胞制备的太早了，不知道还可以继续用吗，提前2-3天的还可以用吗？谢谢各位

[ Last edited by xuanzhang on 2011-10-21 at 19:17 ]
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1楼 2011-10-19 22:17:17
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zhb1986free

金虫 (初入文坛)
★
tuobaohua: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来科研版！ 2012-03-23 14:25:36
我是现用现做的，效果也蛮好的。另外，现在都不做腹腔巨噬细胞了，现在都直接用空白小鼠的脾细胞作为饲养细胞。
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7楼2012-03-23 09:49:40
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weigb503

铁杆木虫 (小有名气)
★
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shiliushu44(金币+5): 2011-10-22 16:20:47
饲养细胞主要是未免疫小鼠的腹腔细胞或者胸腺细胞，他们可以促进融合细胞的生长或者繁殖。一般情况下想要提前一天制备，可达到更好的效果。如果提前制备饲养细胞因为不能无限扩增。所以2-3天以后饲养细胞已经死掉很多了。如果碰见这种情况的话，可以在做融合的时候取同品系的三周小鼠的胸腺细胞或者腹腔细胞做为饲养细胞。在融合的最后一步加入血清的时候加入所取饲养细胞。充分混合以后。铺板即可。祝楼主实验顺利。
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2楼2011-10-20 10:38:20
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baifuliang

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
最好是用前一天制备的，时间长会有很长死细胞，我做的时候都是用》95%活细胞做的，祝你好运！
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4楼2011-10-23 13:26:13
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wuyongcong

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
饲养层细胞，如胸腺细胞，一般存活4-5天，就有约90%以上的死亡率。其实，你可以取脾时，顺带取3周的小鼠胸腺细胞做饲养层。
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5楼2011-10-23 18:16:36
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