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cxch1224

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌DH5a作感受态,PMD-19T载体连接重组的问题

请问我没有用蓝白筛选,除了看lb平板上生长菌体大小外,还有没有什么诀窍区分自连和转化子?谢谢
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shine372

木虫 (小有名气)


zhang8826857(金币+1): 鼓励回帖,帮助lz回答要尽量详细哦^_^ 2011-10-22 11:34:19
一般的抗生素平板筛选,随便挑几个单菌落都可以的
或者可以用菌落PCR ,以菌落为模板,跑胶验证下
3楼2011-10-22 11:27:58
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李寡人

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励回帖帮助lz 2011-10-20 11:39:03
cxch1224(金币+5): 恩恩,谢谢 2011-10-20 20:19:52
没有,我们用的也是这个载体,连接效率很高,可能酶不同,
随便挑,菌液PCR检测几乎没有假阳性,
如果是做文库,没必要蓝白筛选,关键是要高阳性率
单克隆基因测序用更没必要筛选
2楼2011-10-20 09:38:01
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