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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌DH5a作感受态，PMD-19T载体连接重组的问题
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cxch1224

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌DH5a作感受态，PMD-19T载体连接重组的问题

请问我没有用蓝白筛选，除了看lb平板上生长菌体大小外，还有没有什么诀窍区分自连和转化子？谢谢
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cxch1224

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1楼 2011-10-19 20:55:17
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李寡人

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励回帖帮助lz 2011-10-20 11:39:03
cxch1224(金币+5): 恩恩，谢谢 2011-10-20 20:19:52
没有，我们用的也是这个载体，连接效率很高，可能酶不同，
随便挑，菌液PCR检测几乎没有假阳性，
如果是做文库，没必要蓝白筛选，关键是要高阳性率
单克隆基因测序用更没必要筛选
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2楼2011-10-20 09:38:01
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shine372

木虫 (小有名气)
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励回帖，帮助lz回答要尽量详细哦^_^ 2011-10-22 11:34:19
一般的抗生素平板筛选，随便挑几个单菌落都可以的
或者可以用菌落PCR ，以菌落为模板，跑胶验证下
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3楼2011-10-22 11:27:58
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cxch1224

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
恩。谢谢
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4楼2011-10-22 15:23:29
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