应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TCA/丙酮沉淀，蛋白为什么不溶呢？？
51/1返回列表
查看: 6947  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] TCA/丙酮沉淀，蛋白为什么不溶呢？？

大家好，我用0.2%DTT,10%TCA的丙酮溶液沉淀蛋白后，为什么蛋白就是不溶呢？？一直是离心后的那种块状，不能被溶解开啊，大家知道是什么原因吗？？我的裂解液成分是：9M尿素，1%DTT,4%CHAPS,0.2%CA,沉淀后干燥12分钟，室温溶解了6个小时候，还是块状，大家指教下啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-16 02:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

求索寻觅

金虫 (小有名气)
★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-17 18:47:59
引用回帖:
6楼: Originally posted by hrjxx at 2011-10-17 02:02:48:
我提的是动物肌肉蛋白啊

我觉得不要用TCA法，我现在直接用7M尿素，2M硫尿的方法，离心35000g（我们实验室达不到40000g或者100000g）4度离心60min，聚焦电压也可以达到7000v，我觉得应该没什么很大问题。
我现在也在做预实验，我的聚焦没什么问题了，但是第二向效果不佳，要么有横纹，要么点有拖尾，很苦恼呢。
ps：我提的动物肝脏蛋白，多多交流。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-10-17 18:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-16 10:53:05
hrjxx(金币+2): 谢谢啊 ，你们一般干燥多长时间啊 ？？ 2011-10-16 16:57:50
干燥时间太长，一般干燥是沉淀为半透明状就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
一切开始于结束之后
2楼2011-10-16 07:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蕾雷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励应助！ 2011-10-16 10:52:46
hrjxx(金币+2): 谢谢啊，离心转速低了，会不会蛋白沉淀不完全啊 ？ 2011-10-16 16:59:36
丙酮沉淀完 离心的转速不要太高  离心的时间不要太长 能把上清去除就行，干燥的时候 注意不要时间很长 另外 你的裂解液 可以放2m 硫脲
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-16 09:06:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hrjxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蕾雷 at 2011-10-16 09:06:24:
丙酮沉淀完 离心的转速不要太高  离心的时间不要太长 能把上清去除就行，干燥的时候 注意不要时间很长 另外 你的裂解液 可以放2m 硫脲

伯乐说明上，推荐我们的是35000G了 ，别的好像都是小于20000G的
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-16 20:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666！
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭