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zlong2008

木虫 (正式写手)

[求助] 关于HPLC保留时间的问题

这几天一直在做hplc.但是每天的标准品保留时间都不一样,而且是越来越长。最短的和最长的能够相差将近20分钟,刚开始没有用柱温箱,今天用了,柱压明显降低,但是保留时间却比没有用柱温箱的时候延长了。流动相是一样的,进样量也是一样的,请问问题出在哪里啊。是不是色谱柱有问题了啊。
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在压力中前进
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

这面这么多人应助了,我就不应助了,随便谈谈。

三个原因:
1、梯度结束后重新平衡时间不足;
2、流动相极性变化(主要是有机相的蒸发,有些物质,对极性变化极敏感。个人实例:多加0.5ml乙腈,保留时间提前1.5min。建议:既然能走梯度,也就是说所使用的液相是多元泵,有机、无机分在不同的泵)
3、流动相PH变化(主要针对有酸碱性的样品,流动相pH在样品pKa正负1范围内,保留时间变化较大,可以用离子态分子态去理解,离子态,样品极性增加)
守候在风中的宁静。
11楼2011-10-19 17:09:48
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