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hhz0104

金虫 (正式写手)

[交流] DGGE银染后可否回收DNA 已有4人参与

DGGE银染后能否割胶回收DNA进行PCR,回收效果好不好?
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yubwer

新虫 (初入文坛)

是否变性?
2楼2011-10-13 17:12:33
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hhz0104

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yubwer at 2011-10-13 17:12:33:
是否变性?

用的是聚丙烯酰胺变性胶
3楼2011-10-13 17:44:18
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by hhz0104 at 2011-10-13 17:44:18:
用的是聚丙烯酰胺变性胶

挖带后,捣烂,用ddH2O稀释,再做一轮扩增,后在琼脂糖上点样,回收,这样效果会好一些!
真相是最大的奢侈品
4楼2011-10-13 17:54:11
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hhz0104

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wanhscn at 2011-10-13 17:54:11:
挖带后,捣烂,用ddH2O稀释,再做一轮扩增,后在琼脂糖上点样,回收,这样效果会好一些!

好的,我下回试试,我之前用TE溶解后PCR电泳是有条带,可送出去测序测不出来
5楼2011-10-13 19:09:57
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ct86117

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同问,用sybrgreen 染色,切胶,溶于50微升DDH20,但是扩增不出来,有什么原因啊?
6楼2012-05-14 14:16:28
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侯云hy

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以割胶回收,将条带切下来,放在50ul 灭菌水中,4度过夜,第二天再进行PCR . 我一直是这样做的,条带很亮。
7楼2012-06-12 13:51:30
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