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zyx335588

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专业: 植物病理学

[求助] 关于SDS-PAGE电泳问题

最近跑SDS_PAGE总是出现拖尾现象，在浓缩胶时跑的挺正常的，但到分离胶后溴酚蓝条带便变的非常宽，考马斯亮蓝热色脱色后见图片，请各位高手帮忙分析一下原因。
电泳条件是：电压浓缩胶80V，分离胶160V；甘氨酸缓冲液为5倍母液稀释；制胶的30%的丙烯酰胺及TEMED为10个月前购买的伯乐产品，浓缩胶1M Tris pH 6.8，分离胶1.5M Tris pH 8.8，10% 过硫酸铵等其他溶液均为新配制，所用电泳仪为伯乐迷你电泳仪。

第一幅图的前两个泳道为菌体加热处理后的样品

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1楼2011-10-11 10:31:03

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彭俊杰9

新虫 (初入文坛)

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专业: 生物信息学

引用回帖:

10楼: Originally posted by sunnyseu at 2012-06-07 21:26:35
1.最好在跑胶时候每个孔里的加样量或者说是蛋白浓度保持大致一致。。且蛋白浓度最好是都稀释到od=4.0...这个是我老师摸索出的条件。。这样的浓度跑出的电泳条带比较清晰
2.分离胶的电压太高了。。。最后低于130V
...

什么OD=4.0？波长是多少？