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hzy123321木虫 (初入文坛)
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[求助]
重叠延伸PCR设计引物
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请问设计的每一个引物都需要相同的Tm值吗？ 另外，我需要把两个基因连接在一起，但是基因片段很短，只有36bp，设计的引物相互重叠的长度是多少比较合适？ 在设计引物的时候还要注意哪些才能保证PCR成功呢？ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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hzy123321
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4楼2011-10-10 19:53:59
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【答案】应助回帖
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wanhscn(金币+3): Good！ 2011-10-09 23:05:58
wanhscn: 待楼主反馈后，将会授予专家指数！ 2011-10-10 09:35:09
hzy123321(金币+20): 我知道怎么做了 分给你吧 谢谢 2011-10-12 10:30:22
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): 根据楼主回复！专家指数补上！ 2011-11-26 20:58:24
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hzy123321(金币+20): 我知道怎么做了 分给你吧 谢谢 2011-10-12 10:30:22
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1.Tm值相近即可 2.36bp的基因我想知道是什么基因？12个氨基酸的十二肽？有的引物都比他长，为什么要扩增呢？直接DNA合成就行了，就当合成引物了，完了你再连接起来就是了…… 设计引物的时候需要注意的也就是茎环结构什么的不要太多，Tm值相近之类的，你用primer5.0他们会有打分的，资源帖里面有很详尽的使用方法…… |
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2楼2011-10-09 21:05:03
asznpb
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