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hzy123321木虫 (初入文坛)
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重叠延伸PCR设计引物
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请问设计的每一个引物都需要相同的Tm值吗? 另外,我需要把两个基因连接在一起,但是基因片段很短,只有36bp,设计的引物相互重叠的长度是多少比较合适? 在设计引物的时候还要注意哪些才能保证PCR成功呢? |
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asznpb
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good! 2011-10-09 23:05:58
wanhscn: 待楼主反馈后,将会授予专家指数! 2011-10-10 09:35:09
hzy123321(金币+20): 我知道怎么做了 分给你吧 谢谢 2011-10-12 10:30:22
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): 根据楼主回复!专家指数补上! 2011-11-26 20:58:24
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hzy123321(金币+20): 我知道怎么做了 分给你吧 谢谢 2011-10-12 10:30:22
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): 根据楼主回复!专家指数补上! 2011-11-26 20:58:24
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1.Tm值相近即可 2.36bp的基因我想知道是什么基因?12个氨基酸的十二肽?有的引物都比他长,为什么要扩增呢?直接DNA合成就行了,就当合成引物了,完了你再连接起来就是了…… 设计引物的时候需要注意的也就是茎环结构什么的不要太多,Tm值相近之类的,你用primer5.0他们会有打分的,资源帖里面有很详尽的使用方法…… |

2楼2011-10-09 21:05:03
asznpb
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3楼2011-10-09 21:35:04
hzy123321
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