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lg20029

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请帮忙鉴定下RNA提取情况,不知道成功没有

arm:请帮忙鉴定下RNA提取情况,不知道成功没有,请给点建议啊,谢谢!
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辛苦啊!
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

都没有人啊
辛苦啊!
2楼2011-10-04 14:50:07
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wanghd2826

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lg20029(金币+1): 谢谢回复哈,在线等 2011-10-04 15:07:09
条带不是很清楚而且有杂质,不知道楼主RNA是用来做什么的?如果是普通RT-PCR的话,纯化下应该没问题的
3楼2011-10-04 14:55:16
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

怎么纯化?有什么杂质,不太懂,初学者,呵呵,望赐教
辛苦啊!
4楼2011-10-04 15:03:06
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

琼脂糖电泳要用甲醛变性胶吗?配方多少?谢谢
辛苦啊!
5楼2011-10-04 15:04:05
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

6楼2011-10-04 15:04:41
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

7楼2011-10-04 15:07:45
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

lg20029(金币+1): 要是有个提的好的给发个图我参照下就好了 2011-10-04 22:44:52
完整的植物RNA提取应该有三条带。28s,18s,5.8s和5s((分子量接近,电泳中很难区分出来,可以看作为一条带)。
若分子量最大的28s亮度较弱,5s和5.8s条带变强或条带下方有弥散,则说明RNA完整性被破坏。且条带越弱,越模糊,说明RNA完整性越差,RNA中所含的信息就越不完整。
楼主,您的带比较模糊,存在降解。因此,建议您重新提取。提取过程中枪头等注意DEPC水处理灭菌,提取过程尽量避免RNA酶污染,可以戴口罩。
8楼2011-10-04 20:37:44
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lg20029

铁虫 (初入文坛)

还在等啊
辛苦啊!
9楼2011-10-04 22:45:02
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lg20029(金币+1): 真漂亮,能否给我qq,我想大侠请教下 2011-10-05 21:56:30
引用回帖:
8楼: Originally posted by chenguestc at 2011-10-04 20:37:44:
完整的植物RNA提取应该有三条带。28s,18s,5.8s和5s((分子量接近,电泳中很难区分出来,可以看作为一条带)。
若分子量最大的28s亮度较弱,5s和5.8s条带变强或条带下方有弥散,则说明RNA完整性被破坏。且条带 ...

这是我最近提得,已经确定rtpcr成功

风雪夜归人
10楼2011-10-05 09:00:32
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