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骄阳微肆

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
liuchenammk(金币+1): 谢谢师兄! 2011-09-21 22:16:34
dhd997(金币+5, MolEPI+1): 鼓励 2011-09-22 08:07:54
银染实验
银染溶液的配置:实验之前准备4℃水
1. 固定液(10%醋酸):20ml冰醋酸,180mlddH2O混匀(通风厨中进行)
2. 染色液:将0.1g AgNO3溶解于100 ml ddH2O中,使用前加0.15ml37%甲醛溶液,必须储存于避光瓶中,防止接触皮肤(通风厨中进行)
3.显影液:将6gNa2CO3溶解于200ml ddH2O中,冷却至4℃, 使用前加0.3ml37%甲醛溶液(通风厨中进行)30μl 0.1M五水硫代硫酸钠;(0.1M Na2S2O3。5H2O:将1.24g Na2S2O3。5H2O溶于50mlddH2O)。放入冰箱中冷却到4摄氏度。
注意事项:
1、        染色液和显影液要现用现配;
2、        显影液必须在4℃使用且必须保存在4℃;
3、        甲醛蒸汽致癌,在通风厨内操作;
4、        实验室中柔和的背景光线有利于降低背景颜色;
5、        显色不能在透光的盒子中进行;
6、        溶液不能直接倒在胶面上,应使盘倾斜后将溶液倒在盘的角上,或者将每种溶液各方一盘,然后将胶从一个盘转到另一个盘;
7、        溶液的体积必须足够将胶全部浸没;
8、        显色过程中盘中须轻轻摇动。

实验步骤:
1、        固定:用刀子轻轻分开玻璃板,将带有凝胶的一块玻璃板放入盛有200ml固定液的盘子中,放在水平摇床上摇动20min或直至染料带完全消失
2、        洗涤:把固定液倒回大烧杯中,然后用ddH2O清洗三次,每次2min
3、        染色:把玻璃板放在盛有100ml染色液的盘子里,在水平摇床上摇动30min
4、        显影:把玻璃板在预冷ddH2O中快速过一下(不超过10s),迅速放入预冷(4℃)的显影液中,显色3-5min或直至所有的带都出现
5、        停止:当出现清晰的条带时,加入先前用过的500ml固定液轻轻摇动,停止显影
6、        用ddH2O将凝胶洗2次,每次2min
7、        晾干,扫描
8、        拍照观察
努力搞科研
2楼2011-09-21 21:07:13
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