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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

[求助] hplc非常诡异的问题-峰不见了

柱子:C18(安捷伦),流动相:55%甲醇:45%(0.1%甲酸),甲酸水溶液ph为4左右,检测波长280,样品大致结构:黄酮葡萄糖醛酸苷
我昨天进了一针样品,在7.5min左右出来一个明显的峰,虽然前面有个小杂峰,但是主峰还是很明显的,但我后来又进了几次(洗脱浓度没变),发现峰没有了,用90%的甲醇冲到25min还是什么都没有,今早又来看看,发现6.5min出来一个小峰,但是不明显。
想问问大家,怎么会出现这样的怪事?样品分解了?没这么快啊~还是样品没打进去?
PS:我定量环20uL,今早我打了100uL的甲醇进去,发现排液口没有液体流出。。。又多试了几次,发现进10uL会有半滴流出。。。如果用注射器来洗进样阀,废液会流出来,我实在是搞不明白了。。。大家看看,我的峰为什么会消失

[ Last edited by muxiachuixue on 2011-9-20 at 11:38 ]
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以无法为有法,以无限为有限
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wchao612

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

muxiachuixue(金币+1): 谢谢 2011-09-21 13:53:31
给你说几种可能,你得一一排除:
1 很有可能没进入检测池,堵了还是漏了?
2 矫正个波长看看,说不定就会有了
4楼2011-09-21 09:45:12
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西湖醉鱼(金币+2): 鼓励新人奖,欢迎常来 2011-09-20 19:46:18
muxiachuixue(金币+1): 六通阀都是新的,估计进样的时候进样针没顶紧 2011-09-20 21:56:45
很有可能是六通阀某个地方漏了。把螺丝拧紧可能有效果
2楼2011-09-20 14:45:33
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

悬乎,盼正解!!!
永远不要带着问题去找你的上司!
3楼2011-09-20 18:55:39
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shyron

木虫 (正式写手)

可以逐步排除问题。
1:看看柱压力是否正常?确保色谱系统中流动相在走。如果流动相都没有了,肯定不会有峰,是吧。
2:如果1中都没有问题,可以进一个甲苯等物质,看是否出峰。排除是否样品分解?进样系统是否有问题?检测器是否有正常响应?如果出峰,液相系统没有问题,从样品上找原因吧。如果不出峰,从进样系统和检测器中找原因。
3:如何从进样系统和检测器中找原因?在基线平稳的流动相中加入有紫外吸收的物质,观察基线是否向上漂移。如果向上,检测器没有问题,反之检测器有问题。
4:如果检测器有问题,很可能是氘灯有问题。如果是进样系统的问题,肯定是样品进不到色谱系统中,可以拆卸检查。
我虽然是小虫,但是拒绝为鸟服务!
5楼2011-09-21 12:59:02
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