6楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-14 09:14:52:
之前阻断时可以不用扩增完整基因，但是你后续试验中要做遗传互补，以排除极性效应或自发突变的情况，以确保是基因被阻断后产生的影响，因此要做遗传互补，这时就需要把整个完整的基因给导回到基因阻断突变株中表达 ...

2楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-10 21:01:08:
基因片段太短，直接敲除有点困难。
同源重组频率与交换片段的长度有关，一般说来，同源臂的长度应不短于 500 bp，且两同源臂的长度应大致相等，否则会对双交换菌株的筛选造成困难。