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核酸序列退火问题,急~!
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各位大侠帮帮忙 最近小弟在做一组克隆,遇到一些问题 原因:由于我要插入的片段很小,两条链加起来总共110bp,所以设计引物做PCR的话,不方便,比较麻烦。 所以我就分别合成了两条互补的链,每条链55bp吧。 我想问的是合成好了怎么退火啊,我的意思是PCR程序怎么设置,退火温度最好是多少,时间呢,我师兄说越长越好,我没搞清楚,还希望各位大侠指点迷津~! 谢谢 |
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zhen_fang
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