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shikongsama

铁虫 (小有名气)

[求助] 核酸序列退火问题,急~!

各位大侠帮帮忙

最近小弟在做一组克隆,遇到一些问题

原因:由于我要插入的片段很小,两条链加起来总共110bp,所以设计引物做PCR的话,不方便,比较麻烦。
所以我就分别合成了两条互补的链,每条链55bp吧。

我想问的是合成好了怎么退火啊,我的意思是PCR程序怎么设置,退火温度最好是多少,时间呢,我师兄说越长越好,我没搞清楚,还希望各位大侠指点迷津~!

谢谢
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韬光养晦
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zhen_fang

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-09-05 15:08:48
shikongsama(金币+1): 谢谢你 2011-09-05 21:13:54
以前的做过一条片段是80几,55的好小啊,延长一定时间试试看,效果怎样,其实这个真的很纠结
2楼2011-09-04 16:47:52
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shikongsama

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen_fang at 2011-09-04 16:47:52:
以前的做过一条片段是80几,55的好小啊,延长一定时间试试看,效果怎样,其实这个真的很纠结

你那时候程序是怎么设置的啊?我是很纠结
谢谢
韬光养晦
3楼2011-09-04 21:02:10
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W85540709

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:13:54
我就是在扩60多的,也一直没扩出来!
聪行雨下
4楼2011-11-17 11:15:29
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