24小时热门版块排行榜    

查看: 1076  |  回复: 3

shikongsama

铁虫 (小有名气)

[求助] 核酸序列退火问题,急~!

各位大侠帮帮忙

最近小弟在做一组克隆,遇到一些问题

原因:由于我要插入的片段很小,两条链加起来总共110bp,所以设计引物做PCR的话,不方便,比较麻烦。
所以我就分别合成了两条互补的链,每条链55bp吧。

我想问的是合成好了怎么退火啊,我的意思是PCR程序怎么设置,退火温度最好是多少,时间呢,我师兄说越长越好,我没搞清楚,还希望各位大侠指点迷津~!

谢谢
回复此楼
韬光养晦
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhen_fang

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-09-05 15:08:48
shikongsama(金币+1): 谢谢你 2011-09-05 21:13:54
以前的做过一条片段是80几,55的好小啊,延长一定时间试试看,效果怎样,其实这个真的很纠结
2楼2011-09-04 16:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shikongsama

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen_fang at 2011-09-04 16:47:52:
以前的做过一条片段是80几,55的好小啊,延长一定时间试试看,效果怎样,其实这个真的很纠结

你那时候程序是怎么设置的啊?我是很纠结
谢谢
韬光养晦
3楼2011-09-04 21:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

W85540709

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:13:54
我就是在扩60多的,也一直没扩出来!
聪行雨下
4楼2011-11-17 11:15:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shikongsama 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +8 梁梁校校 2026-03-19 8/400 2026-03-20 09:08 by 每天只摆一小会
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +3 Charlieyq 2026-03-19 3/150 2026-03-20 08:53 by xingguangj
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +3 sbdksD 2026-03-19 3/150 2026-03-19 23:21 by fmesaito
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +3 葵梓卫队 2026-03-18 5/250 2026-03-19 19:35 by 给你你注意休息
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +5 吃吃吃才有意义 2026-03-19 5/250 2026-03-19 16:18 by 30660438
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
信息提示
请填处理意见