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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 核酸序列退火问题，急～！
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shikongsama

铁虫 (小有名气)

[求助] 核酸序列退火问题，急～！

各位大侠帮帮忙

最近小弟在做一组克隆，遇到一些问题

原因：由于我要插入的片段很小，两条链加起来总共110bp，所以设计引物做PCR的话，不方便，比较麻烦。
所以我就分别合成了两条互补的链，每条链55bp吧。

我想问的是合成好了怎么退火啊，我的意思是PCR程序怎么设置，退火温度最好是多少，时间呢，我师兄说越长越好，我没搞清楚，还希望各位大侠指点迷津～！

谢谢
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韬光养晦
1楼 2011-09-04 13:48:34
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zhen_fang

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利！ 2011-09-05 15:08:48
shikongsama(金币+1): 谢谢你 2011-09-05 21:13:54
以前的做过一条片段是80几，55的好小啊，延长一定时间试试看，效果怎样，其实这个真的很纠结
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2楼2011-09-04 16:47:52
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shikongsama

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen_fang at 2011-09-04 16:47:52:
以前的做过一条片段是80几，55的好小啊，延长一定时间试试看，效果怎样，其实这个真的很纠结

你那时候程序是怎么设置的啊？我是很纠结
谢谢
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韬光养晦
3楼2011-09-04 21:02:10
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W85540709

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:13:54
我就是在扩60多的，也一直没扩出来！
赞一下(1人) 回复此楼
聪行雨下
4楼2011-11-17 11:15:29
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