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曲散人别

银虫 (初入文坛)

[求助] 求有关Heochst 33342/PI双染色法操作的具体步骤

各位大虾:
     本人近期准备做Heochst 33342/PI双染色法实验,想请教大家一些具体步骤和注意事项,谢谢!
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tonyprague1967

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


qinhy(金币+1, PhEPI+1): 多谢应助回帖~ 2011-09-05 19:46:39
曲散人别(金币+25): 2011-09-06 08:16:25
这个指标很简单的,你需要检测的是凋亡吧?你用什么观察?是荧光显微镜还是流式?
如果荧光显微镜的话,可以原位染色,也可以消化后收集细胞染色。
具体方法:
1. 收集细胞(如原位染则弃去培养液),PBS洗涤一次,重悬(如原位染则无需重悬);
2.用Hoechst33342染液(~10 ug/ml)37度避光染色10-15min后,加PI室温避光染色5min(浓度可以具体看试剂盒说明,量我记不清了);
3.上机检测,选择荧光显微镜的蓝光档。
淡定……
2楼2011-09-05 17:23:15
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曲散人别

银虫 (初入文坛)

是荧光显微镜
3楼2011-09-14 10:03:17
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