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tz1301060311

金虫 (小有名气)

[求助] 硫酸铵分级沉淀,不同饱和度组分中蛋白质沉淀的分子量范围是怎么样的?

最近有个位置的糖蛋白需要分离纯化,采用硫酸铵分级沉淀,在上凝胶柱。急切想知道,硫酸分级沉淀沉淀的蛋白质的分子量范围
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擎宇

木虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

tz1301060311(金币+5): 很热心 2011-11-26 17:09:48
可以将硫酸铵沉淀的蛋白复溶一下,然后跑凝胶电泳,以14-96K的标准蛋白作为Marker。
2楼2011-11-23 17:35:06
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tz1301060311

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 擎宇 at 2011-11-23 17:35:06:
可以将硫酸铵沉淀的蛋白复溶一下,然后跑凝胶电泳,以14-96K的标准蛋白作为Marker。

我用葡聚糖凝胶G-100分离,100%饱和度硫酸铵沉淀中都有>150K的组分。
3楼2011-11-25 09:34:36
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擎宇

木虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by tz1301060311 at 2011-11-25 09:34:36:
我用葡聚糖凝胶G-100分离,100%饱和度硫酸铵沉淀中都有>150K的组分。

溶液中硫酸铵的最终浓度是多少啊?分级时,虽然加入的是饱和溶液,但随着饱和溶液加入体积不同,溶液中硫酸铵的最终浓度不同。硫酸铵分级只是用于粗提液。
4楼2011-11-25 10:07:22
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tz1301060311

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 擎宇 at 2011-11-25 10:07:22:
溶液中硫酸铵的最终浓度是多少啊?分级时,虽然加入的是饱和溶液,但随着饱和溶液加入体积不同,溶液中硫酸铵的最终浓度不同。硫酸铵分级只是用于粗提液。

不是加入饱和溶液,分了4级,都是加固体硫酸铵的,25%,50%,75%,100%,之前的每级沉淀都分离出去了,最后一个组分就硫酸铵75%-100%饱和度下的沉淀
5楼2011-11-25 14:21:20
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

tz1301060311(金币+5): 的确没什么直接联系。乙醇沉淀好像和分子量有直接关系 2011-11-26 17:10:44
"硫酸分级沉淀沉淀的蛋白质的分子量范围"

硫酸铵沉淀跟蛋白的分子量没有直接关系。硫酸铵沉淀的主要作用是结合蛋白液中的水,使得蛋白质过饱和析出。跟蛋白的表面电荷量有关系。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2011-11-25 16:02:40
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