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lrj621031金虫 (小有名气)
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[求助]
POD测定时吸光度变化值怎么算的？
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在测定POD活性的时候，要求反应时间内吸光度的变化△A，不知道怎么求了。反应时间为5min的话，那用五分钟点吸光度减去最初的吸光度不就行了么，为什么还要每分钟读一次吸光度呢？难道就为了看它呈线性关系的？求指教啊， |
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junjiew7781
铜虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
lrj621031(金币+5): 3Q 2011-08-29 07:52:20
junwen6516(食品EPI+1): 鼓励 2011-08-29 08:11:59
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:33:45
junwen6516(食品EPI+1): 鼓励 2011-08-29 08:11:59
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:33:45
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要记录反应体系在470nm的吸光度值，然后制作OD470值随时间变化曲线，根据曲线的初始线性部分计算没分钟吸光度变化值△OD470. △OD470=(OD470终-OD470始)/△t,也就是说如果呈线性关系，你就可以用5分钟OD值减除初始OD值再除以5分钟，但是注意酶活性还要以比活性表示，也就是单位时间内单位蛋白催化产生产物量或消耗底物量表示，你还要用考马斯亮蓝法测出蛋白量，最后表示为U=△OD470/V*C, V为测定时吸取提取液体积，C为提取液蛋白浓度；当然你也可以表示为单位重量组织单位时间内改变吸光度值表示。具体你也可以参考曹健康等编写的《果蔬采后生理生化实验指导》第101-103页。 |
2楼2011-08-29 00:06:40