24小时热门版块排行榜    

查看: 3626  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

青色的知了

木虫 (小有名气)

[求助] 目的片段和T1载体连接后转入感受态细胞涂板子总不长菌……

代朋友问的,不是很懂,希望大家能给点意见,不甚感激
    目的片段和T1载体连接后转入感受态细胞涂板子总不长菌……是为什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无踪无影

金虫 (小有名气)

引用回帖:
695164楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-26 22:28:16:
原因太多
1 连接没做好
2 抗生素有无加错(1楼)
3 没有转进感受态里去

问问大侠,这个感受态转化的话,温度42度超过了会有影响吗?涂板的时候手法有什么需要注意的吗?谢谢啦
一切皆有可能
5楼2012-05-21 10:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

ET生物人

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

青色的知了(金币+5): 2011-08-27 19:46:35
抗生素有无加错??
2楼2011-08-26 22:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-08-27 09:26:20
青色的知了(金币+5): 2011-08-27 19:46:42
原因太多
1 连接没做好
2 抗生素有无加错(1楼)
3 没有转进感受态里去
真相是最大的奢侈品
3楼2011-08-26 22:28:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-08-27 09:26:31
青色的知了(金币+5): 2011-08-27 19:46:48
首先排除楼上所指出的问题
其次要做好对照,现在不长菌落,至少要在做转化的时候转一个同你的T-vector相同抗性的质粒看看是不是你的感受态有问题了,同时更精细的,你需要计算你的感受态效率。
如果这些都没有问题,你应该看看你的片段是不是需要加A,或者说是不是KOD之类的PCR系统,如果PCR产物是平端的,是没有办法直接进行TA克隆的!

PS,如果是这样,你的T-vector倒是质量不错啊,呵呵
致良知
4楼2011-08-26 23:17:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 9/450 2026-03-17 10:29 by xujiaoszu
[考研] 材料专硕326求调剂 +5 墨煜姒莘 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:30 by 木瓜膏
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
信息提示
请填处理意见