| 查看: 2570 | 回复: 19 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
Ag6501金虫 (正式写手)
|
[交流]
蛋白酶基因表达,用的Bacillus subtilis系统,但总是表达不出,求高人指点…… 已有11人参与
|
||
|
最近在用Mo Bi Tec的WB800N菌株和pHT43载体这个系统做蛋白酶基因的表达,基因序列全部正确,方法是:1、将转化过的菌株过夜培养,37度,220rpm;2、取菌液100微升转接入新培养基,37度,220rpm,培养至OD600为0.7-0.8之间,加入IPTG使终浓度为1mM;3、继续培养,并让转速降一些,37度,3h;4、检测蛋白酶的表达。 但始终没有检测到蛋白产物,求各位高人指点,究竟是哪里出了问题,谢谢! 真愁,哎~~~~ |
» 本帖已获得的红花(最新10朵)
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线:以精准检测,护健康基石
已经有0人回复
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有59人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验中的趣事:和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
蛋白质检测:精准分析,解锁生物分子的密码
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之小鼠实验:严谨设计,解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之重金属检测:精准筛查,守护健康与环境的防线
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:
如何中和掉酸但又避免产生大量热
已经有33人回复
求助:关于基因表达调控机制的问题
已经有9人回复
求助基因在不同发育时期表达的数据怎样用spss分析
已经有3人回复
基因表达分析怎样做
已经有9人回复
求助:关于基因表达中调控蛋白和转录调控蛋白的连接和表达
已经有5人回复
酶基因表达量高,酶活性就一定高吗?(请大家帮帮忙,谢谢)
已经有12人回复
【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌
已经有11人回复
【求助/交流】大肠杆菌表达系统蛋白酶对目的蛋白的水解问题
已经有11人回复
【求助/交流】在构建基因表达载体的时候什么时候需要人为地在上面加上启动子?
已经有6人回复

yyongl-168
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1822.2
- 散金: 666
- 红花: 1
- 帖子: 397
- 在线: 280.7小时
- 虫号: 287318
- 注册: 2006-10-17
- 专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
|
楼主,能否提供一份WB800N菌株和pHT43载体给我?当然我们也可以互换的,我手头有下列质粒和菌株, 大肠杆菌表达系统: 质粒:pET3a,pET28a,pET30a,pET32a,pGEX-4T-1;菌株:BL21(DE3),Rostta 酵母表达系统: 质粒:pPIC9K,pYES2;菌株:GS115,INVSc1 乳酸菌表达系统: 质粒:pIL253,pLEM415,pJIM1715,pMG36e;菌株:MG136 酵母基因敲除系统: 质粒:pRS426,pCSN44;菌株:FY834 乳酸菌基因敲除系统: 质粒:pFED760,pJC159 植物表达质粒(GATEWAY系统): 质粒:pK2GW7,pKGWFS7,pENTR-2B 丝状真菌相关质粒: 基因定位质粒:pANGH3;基因敲除质粒:pPK2,pFG1,pMD18T-bar;启动子功能分析质粒:pSJ3,pSJ4 酵母双杂交系统: 质粒pGADT7,pGBKT7;菌株:AH109 如果可以交换,请联系我。QQ:39113616;email: yyongl-168@163.com |
13楼2012-05-04 21:48:01









回复此楼
xbl3688