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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

引用回帖:
10楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-08-26 12:26:12:
我回头check下,貌似5min是不够……

瓜兄,看来你好久没有做过PCR了。。。不扎实啊。。。哈哈。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
11楼2011-08-26 13:30:41
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longage.gene

银虫 (小有名气)


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-26 17:44:32
引用回帖:
11楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-26 13:30:41:
瓜兄,看来你好久没有做过PCR了。。。不扎实啊。。。哈哈。。。

和酶,菌都有很大关系的,我用kod或者gotaq只要2min。
12楼2011-08-26 14:38:12
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guojianping

木虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 大批量筛的时候还是PCR方便呢,可以先用PCR筛出一部分,再用酶切验证这拼candidate。 2011-08-26 17:44:17
菌液PCR很多时候不靠谱,还是提取质粒在P试试看吧,酶切严格验证就好了
13楼2011-08-26 15:33:10
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-26 13:30:41:
瓜兄,看来你好久没有做过PCR了。。。不扎实啊。。。哈哈。。。

看了下记录,菌落PCR我们用的变性时间是5分钟,普通PCR是两分钟。确实很久没做了。
14楼2011-08-26 17:42:06
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
12楼: Originally posted by longage.gene at 2011-08-26 14:38:12:
和酶,菌都有很大关系的,我用kod或者gotaq只要2min。

菌落PCR只是验证而已,你们都用上kod了,有钱啊
我们验证类PCR用的都是自己做的Taq酶
15楼2011-08-26 17:45:24
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wlsino

金虫 (小有名气)

菌液太多了
可能会影响PCR
饱和的菌,用枪头蘸一下就可以了,体积忽略不计

上样孔是细菌基因组
16楼2011-08-26 20:07:12
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longage.gene

银虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-08-26 17:45:24:
菌落PCR只是验证而已,你们都用上kod了,有钱啊
我们验证类PCR用的都是自己做的Taq酶

只是说明一下,一般情况下菌落pcr我们也不用kod
自己做Taq
17楼2011-08-27 09:20:16
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