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madengyu

禁虫 (小有名气)

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wlsino

金虫 (小有名气)

菌液太多了
可能会影响PCR
饱和的菌,用枪头蘸一下就可以了,体积忽略不计

上样孔是细菌基因组
16楼2011-08-26 20:07:12
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shuihaizi

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我认为你的模板量太大了 ,我做10ul体系的,过夜摇菌,只用0.2ul足够了,效果挺好的。
2楼2011-08-26 09:50:25
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

你做菌液PCR是想干什么?扩载体上的一段序列还是什么?
还是做克隆验证呢?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-08-26 10:24:49
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的胶图中连一点抹带都没有,Marker后面三孔最下端隐约还能看到引物二聚体的影子,我怀疑是模板有问题,就是说假阳性或者摇的菌出了问题(有沉淀,一般刚摇完的菌是没有沉淀的)。
    下次做菌液pcr的时候最好拿个已知的目的基因做个正对照,这样就可以排除pcr体系和程序的问题,因为菌液pcr影响因素蛮多的。
生活的乐趣在于善于发现美,学会欣赏美
5楼2011-08-26 10:42:48
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