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1289622

木虫 (正式写手)

[求助] 生物样品处理的几个问题

1、做血浆标准曲线、组织混悬液的标准曲线要灭活吗?怎样操作的?用什么试剂灭活啊?
做标曲必须用内标物吗?身情况下用?怎样选?
标曲是药物浓度—峰面积还是药物质量-峰面积?有点糊涂!!

2、看到血样提取有用超声的,先涡旋3min,再超声10min,超声有什么作用?功率多大?

3.体外组织代谢试验中匀浆为什么不能用水?
  用什么样的溶液最好?做肝、肾等器官的体外代谢都用什么溶液好呢?

4、以免其他原因造成样品损坏,生物样品可以保存一部分以备后用吗?怎样保存?

[ Last edited by 1289622 on 2011-8-25 at 21:52 ]
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1289622(金币+8): 2011-09-04 15:46:38
1、许多不需要灭活,空白血浆(或组织)需要保存在-20度保存分析,为了防止降解,样品前处理尽量操作迅速,还有对于一些对光敏感的化合物,需要避光操作。如果非要灭活,可以加少量的高氯酸或者NaOH等。做标曲几乎都需要内标,结构类似几乎就可以,当然有同系物更好。标曲是血药浓度/峰面积Ai(其中C血药=C测得/Rs回收率)。
2、不是超声吧?是离心吧,是用centrifugation吗?一般一万二离心10min。
3、一般用生理盐水。由于体液的缘故,用生理盐水,细胞不易变形破坏(生理盐水是等渗溶液)。是不是肝、肾培养可以用相应的器官培养组织液呀!你查阅一下相关文献。
4、可以,一般注意保存在-80度,注意温度、PH、酶活代谢、光等因素。等会儿给你发一篇生物样品前处理的综述,很明白。
4楼2011-09-03 23:42:46
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longshanzhao

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-09-04 23:07:49
做标曲最好用内标物,准确定量,一般选择同系物,标曲是药物浓度和峰面积的比值(As/Ai)。
天道酬勤
2楼2011-09-01 22:26:44
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hongqianqian

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1289622(金币+2): 2011-09-04 15:46:58
1.灭活酶,用酶抑制剂。也没那么绝对吧。
2.去除乳化现象?
3.在水中肯定没有在缓冲溶液中稳定,一般用PBS或者生理盐水。
4.可以,-20或-80摄氏度保存。
快乐多多,好运多多~
3楼2011-09-03 21:02:43
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

样品前处理的经典文献一篇附上。
5楼2011-09-03 23:45:36
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