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gwzjiayou

金虫 (小有名气)

[求助] 关于用于扫描电镜的植物样品固定、脱水、干燥等处理的问题

各位高手,想请教一下,我想做植物叶片、茎秆的扫描电镜,观察比较发病和没发病的叶片等。
(1)我知道叶片可以用2.5%的戊二醛固定,然后4℃保存;但是不知道植物的茎段怎么固定处理?
(2)我们刚从外地采样回实验室,放在-20℃冰箱保存,这样能够保存多久呢?放久了会不会影响发病植物样品的结构呢?如果现在把样品都放在戊二醛里面固定,4℃冰箱又能保存多久呢?
(3)电镜样品固定后要脱水、干燥等,那么植物叶片、茎段这样的样品有没有特别的处理方法呢?有什么注意事项吗?
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5): 鼓励应助 2011-08-22 19:37:59
gwzjiayou(金币+7): 谢谢! 2011-08-27 19:30:48
叶片如果可以,就应该用Cryo-SEM,低温扫描电镜做。
茎的话,如果可以先拍显微镜或者相机拍下。然后直接上SEM。因为茎的结构比较牢固,相对来说,不是那么容易变形。所以没有必要再脱水什么的。直接喷金就OK了。

生物材料,最忌讳放的时间长。尽可能做掉吧。
2楼2011-08-22 18:03:48
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3楼2011-08-22 18:19:48
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

是的
尽快做
-20℃久了结构就不好了
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
4楼2011-08-23 12:16:58
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gwzjiayou

金虫 (小有名气)

我们的测试中心可以做环扫,但是那边的老师要求我们要自己处理样品,而且因为用的高真空模式所以要求样品要干燥。所以想请教各位植物组织的固定、脱水、干燥等步骤有特殊要求吗?具体是什么样的呢?
其次,难道茎部只用固定处理然后直接喷金观察吗?
5楼2011-08-24 22:43:38
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

gwzjiayou(金币+8): 谢谢! 2011-08-27 19:31:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by gwzjiayou at 2011-08-24 22:43:38:
我们的测试中心可以做环扫,但是那边的老师要求我们要自己处理样品,而且因为用的高真空模式所以要求样品要干燥。所以想请教各位植物组织的固定、脱水、干燥等步骤有特殊要求吗?具体是什么样的呢?
其次,难道茎 ...

根据你们的条件,我估计你做样品有点难度。
你们的电镜可能不是用来做生物鲜样分析的。
如果是做生物鲜样分析,一般都会配低温冷台。可以使样品在-180C以下进行SEM拍摄。
可能你的情况的确需要经过脱水处理。
不管怎么样的处理,你都不可能达到原始样品的样子,所以也无所谓怎么处理合适了。先将就拍拍看,是否能够有你想要的数据。
如果真的不能够满意,建议你们取样品后,直接联系有CryoSEM的单位。
千把块钱应该能够拍到。
6楼2011-08-26 15:55:38
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