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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 关于用于扫描电镜的植物样品固定、脱水、干燥等处理的问题
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gwzjiayou

金虫 (小有名气)

[求助] 关于用于扫描电镜的植物样品固定、脱水、干燥等处理的问题

各位高手，想请教一下，我想做植物叶片、茎秆的扫描电镜，观察比较发病和没发病的叶片等。
（1）我知道叶片可以用2.5%的戊二醛固定，然后4℃保存；但是不知道植物的茎段怎么固定处理？
（2）我们刚从外地采样回实验室，放在-20℃冰箱保存，这样能够保存多久呢？放久了会不会影响发病植物样品的结构呢？如果现在把样品都放在戊二醛里面固定，4℃冰箱又能保存多久呢？
（3）电镜样品固定后要脱水、干燥等，那么植物叶片、茎段这样的样品有没有特别的处理方法呢？有什么注意事项吗？
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1楼 2011-08-22 16:58:42
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5): 鼓励应助 2011-08-22 19:37:59
gwzjiayou(金币+7): 谢谢！ 2011-08-27 19:30:48
叶片如果可以，就应该用Cryo-SEM，低温扫描电镜做。
茎的话，如果可以先拍显微镜或者相机拍下。然后直接上SEM。因为茎的结构比较牢固，相对来说，不是那么容易变形。所以没有必要再脱水什么的。直接喷金就OK了。

生物材料，最忌讳放的时间长。尽可能做掉吧。
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2楼2011-08-22 18:03:48
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yuyi213
3楼2011-08-22 18:19:48
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
是的
尽快做
-20℃久了结构就不好了
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
4楼2011-08-23 12:16:58
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gwzjiayou

金虫 (小有名气)
我们的测试中心可以做环扫，但是那边的老师要求我们要自己处理样品，而且因为用的高真空模式所以要求样品要干燥。所以想请教各位植物组织的固定、脱水、干燥等步骤有特殊要求吗？具体是什么样的呢？
其次，难道茎部只用固定处理然后直接喷金观察吗？
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5楼2011-08-24 22:43:38
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

gwzjiayou(金币+8): 谢谢！ 2011-08-27 19:31:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by gwzjiayou at 2011-08-24 22:43:38:
我们的测试中心可以做环扫，但是那边的老师要求我们要自己处理样品，而且因为用的高真空模式所以要求样品要干燥。所以想请教各位植物组织的固定、脱水、干燥等步骤有特殊要求吗？具体是什么样的呢？
其次，难道茎 ...

根据你们的条件，我估计你做样品有点难度。
你们的电镜可能不是用来做生物鲜样分析的。
如果是做生物鲜样分析，一般都会配低温冷台。可以使样品在-180C以下进行SEM拍摄。
可能你的情况的确需要经过脱水处理。
不管怎么样的处理，你都不可能达到原始样品的样子，所以也无所谓怎么处理合适了。先将就拍拍看，是否能够有你想要的数据。
如果真的不能够满意，建议你们取样品后，直接联系有CryoSEM的单位。
千把块钱应该能够拍到。
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6楼2011-08-26 15:55:38
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