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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 引物二聚现象
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小星2011320

铁虫 (初入文坛)

[求助] 引物二聚现象

我引物合成了两管，先用了一管，另一管以干粉状态储存在-20度中，一个月之后新溶解引物，然后做PCR，好多都出现了引物二聚的现象，而且还很严重。提高退火温度也不行。第一次做的时候并没有出现引物二聚呀。这是怎么回事？求解！谢谢~
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1楼 2011-08-19 20:30:55
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w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
看天(金币+3): 鼓励回答 2011-08-19 23:56:27
稀释就可以了，用量和第一次比减半。
很可能是这样，干粉运来的时候有很多附着在ep管盖上，融第一管的时候一个不小心就飞出去很多，而第二管冻存，时间久了就都跑在管底去了，造成实际浓度比第一管高。
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How about the future？
3楼2011-08-19 21:29:44
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励一下 2011-08-19 23:56:16
引用回帖:
1楼: Originally posted by 小星2011320 at 2011-08-19 20:30:55:
我引物合成了两管，先用了一管，另一管以干粉状态储存在-20度中，一个月之后新溶解引物，然后做PCR，好多都出现了引物二聚的现象，而且还很严重。提高退火温度也不行。第一次做的时候并没有出现引物二聚呀。这是怎 ...

想知道一下，你的PCR有没有做出来，如果你能跑出条带来，就不用管它了，还有你的引物有没有用软件分析一下二聚体形成情况啊
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2011-08-19 20:41:10
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