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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 离子交换层析(deae-纤维素)出峰差异很大(有图谱)

昨天用DEAE-纤维素过柱子,图谱如1,目标蛋白跟杂蛋白差没分开,今天用相同的缓冲液相同的上样量和样品,结果却一点都没分开,柱子1*20,上样2ml,梯度洗脱液为50mL 20mmo/L pH7.5 Tris一乙酸缓冲液和50ml 50mmol/L pH5.0Tris一乙酸缓冲液(含0.3mol/L 氯化钠),得到的图谱却是2和3的样子,请教各位长辈这是为什么?洗脱液要怎么调节才能将得到较好的洗脱效果?
                             图1

                                                  图2

                                                  图3


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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

liuliancy(金币+1): 好的,谢谢!! 2011-08-21 09:56:40
上样量太多达不到很好的纯化效果吧 1%
13楼2011-08-20 17:01:29
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