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mengxibio

新虫 (小有名气)

[交流] 荧光PCR体系中是否需要加BSA 已有4人参与

我们实验室几乎成了两派,一方说应该加,可以抵抗腐殖质,另一部分说不需要,而且两方有时实验不同,效果各异。
大家平时做荧光pcr时是否添加bsa
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cloverplm

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by gloryping at 2011-08-27 13:25:07:
您好,请问BSA的量加多少合适啊 按什么比例加的?

这个应该需要你自己摸索,试剂不同可能量要求不同。我的是25微升的反应管,加入了1%BSA 0.05微升。反正很少的量就够了。
净——静——竞——进
6楼2011-08-29 19:59:05
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
楼主是否可以咨询一下试剂盒的技术顾问!
jiayoubashaonian
2楼2011-08-09 19:38:24
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gwbk

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
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amisking(金币+4, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-09 20:56:42
BSA will coat the tube walls, preventing the template from being absorbed. This will reduce the frequency of primer dimers that occurs when the template concentration is low. BSA is also used to reduce the inhibition caused by humic acid contaminants.

源文档 <http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/6051.html>

Bovine Serum Albumin (BSA) is ideal for stabilization of enzymes during storage and for enzymatic reactions where the absence of nucleases is essential. BSA increases PCR yields from low purity templates. It also prevents adhesion of enzymes to the reaction tubes and tip surfaces.

源文档 <http://www.fermentas.com/en/prod ... rs-reagents/b14-bsa>[ Last edited by gwbk on 2011-8-9 at 20:54 ]
3楼2011-08-09 20:51:31
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cloverplm

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+4): 很有经验,楼主可以确信了。 2011-08-09 22:17:14
要的要的,偶做过对比试验的,加BSA明显比不加BSA组曲线更好看,背景值更小。
净——静——竞——进
4楼2011-08-09 21:21:48
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