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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 建基因文库是为什么？弱弱的问一下，新手
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longage.gene

银虫 (小有名气)

[求助] 建基因文库是为什么？弱弱的问一下，新手

建基因文库是为什么？要取基因的话，直接提取全dna后pcr不就行了？
新手，别笑，望答案
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【分子生物】EPI帖

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1楼 2011-08-04 17:49:57
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

建基因组文库的方法在微生物领域里用处很大：
微生物分子生态领域，很多环境，如土壤，植物内生，微生物是不可培养的，但是可以直接提取总DNA，然后PCR出其保守序列如16sDNA,把这些保守序列连接载体，建立文库，这样可以拿去测序，分析代表不同菌属的保守序列的多样性。
微生物药物学领域，同样，特殊生境下，拿DNA序列比拿到微生物容易，用已知功能性状的引物去P出功能序列，在建立文库，可以方便下一步异源表达，或者，随机酶切总DNA，把片段连接载体建库，再用各自模型筛选需要的序列。
总之，现在的宏基因组概念核心就是建库，先拿到包含各自未知序列的宝藏，再有各种手段分析这里面有些什么好东西，能得到什么样的信息。
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不卑不亢
6楼2011-08-05 09:03:18
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-04 18:34:54
目的多为为了得到某种DNA序列，例如克隆基因，克隆16S来分析种群多样性。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-08-04 18:22:00
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-05 08:04:35
你说的是知道基因序列或者至少知道两端的序列的情况了。序列的任何信息都不知道的情况下用PCR你怎么设计引物，怎么去扩增这个基因？
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3楼2011-08-04 19:47:36
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cloverplm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有些特殊的序列是PCR不能得到的，比如嗜高温菌，其基因组序列本身GC含量很高，退火温度有可能是90℃+。
通过基因合成能得到序列。
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净——静——竞——进
4楼2011-08-04 22:11:51
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