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建基因文库是为什么?弱弱的问一下,新手
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longage.gene
银虫
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专业: 微生物生理与生物化学
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建基因文库是为什么?弱弱的问一下,新手
建基因文库是为什么?要取基因的话,直接提取全dna后pcr不就行了?
新手,别笑,望答案
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1楼
2011-08-04 17:49:57
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swaucq
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注册: 2011-05-27
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
建基因组文库的方法在微生物领域里用处很大:
微生物分子生态领域,很多环境,如土壤,植物内生,微生物是不可培养的,但是可以直接提取总DNA,然后PCR出其保守序列如16sDNA,把这些保守序列连接载体,建立文库,这样可以拿去测序,分析代表不同菌属的保守序列的多样性。
微生物药物学领域,同样,特殊生境下,拿DNA序列比拿到微生物容易,用已知功能性状的引物去P出功能序列,在建立文库,可以方便下一步异源表达,或者,随机酶切总DNA,把片段连接载体建库,再用各自模型筛选需要的序列。
总之,现在的宏基因组概念核心就是建库,先拿到包含各自未知序列的宝藏,再有各种手段分析这里面有些什么好东西,能得到什么样的信息。
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6楼
2011-08-05 09:03:18
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冼亮淀粉酶
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帖子: 6622
在线: 2795.9小时
虫号: 856414
注册: 2009-09-25
性别: GG
专业: 环境微生物学
管辖:
微生物
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-04 18:34:54
目的多为为了得到某种DNA序列,例如克隆基因,克隆16S来分析种群多样性。
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼
2011-08-04 18:22:00
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lxj341401
至尊木虫
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-05 08:04:35
你说的是知道基因序列或者至少知道两端的序列的情况了。序列的任何信息都不知道的情况下用PCR你怎么设计引物,怎么去扩增这个基因?
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3楼
2011-08-04 19:47:36
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cloverplm
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
还有些特殊的序列是PCR不能得到的,比如嗜高温菌,其基因组序列本身GC含量很高,退火温度有可能是90℃+。
通过基因合成能得到序列。
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净——静——竞——进
4楼
2011-08-04 22:11:51
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