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longage.gene

银虫 (小有名气)

[求助] 建基因文库是为什么？弱弱的问一下，新手

建基因文库是为什么？要取基因的话，直接提取全dna后pcr不就行了？
新手，别笑，望答案
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1楼 2011-08-04 17:49:57
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): good 2011-08-05 08:04:51
longage.gene(金币+2): 2011-08-05 09:09:47
引用回帖:
1楼: Originally posted by longage.gene at 2011-08-04 17:49:57:
建基因文库是为什么？要取基因的话，直接提取全dna后pcr不就行了？
新手，别笑，望答案

一些未知基因是不能通过PCR扩增得到的。

基因文库的概念是：一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后，将酶切片段插入到载体DNA分子中，所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体，将包含这个生物体的整个基因组，也就是构成了这个生物体的基因文库。

基因文库的用途很多，比如：
1）分离基因，特别是分离高等真核生物基因的有效手段。在基因文库中，不同的 DNA片段都分别在不同的克隆中扩增了，只要有该基因的探针存在，则从基因文库中筛选一个所需的克隆是一项比较简单的工作。此外，基因文库中被克隆的 DNA都是基因组中各种随机的顺序片段，某些 DNA片段还包括基因外部的邻近的甚至互相跨叠的序列，所以基因文库特别有利于研究天然状态下基因的顺序组织。

2）基因文库还可以应用在个体发育的研究中。例如从芽孢杆菌的正在形成芽孢的菌体中分离mRNA，并用同位素标记做成探针，用这些探针可以从芽孢杆菌的基因文库中分离出只在芽孢形成过程中活动的基因，有助于对发育过程中基因调控进行研究。

3）基因文库也可以应用在高等生物，例如人的基因定位工作中。基因文库在生产实际中也是取得所需要的基因的一种重要方法。
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5楼2011-08-04 22:28:33
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-04 18:34:54
目的多为为了得到某种DNA序列，例如克隆基因，克隆16S来分析种群多样性。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-08-04 18:22:00
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-05 08:04:35
你说的是知道基因序列或者至少知道两端的序列的情况了。序列的任何信息都不知道的情况下用PCR你怎么设计引物，怎么去扩增这个基因？
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3楼2011-08-04 19:47:36
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cloverplm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有些特殊的序列是PCR不能得到的，比如嗜高温菌，其基因组序列本身GC含量很高，退火温度有可能是90℃+。
通过基因合成能得到序列。
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净——静——竞——进
4楼2011-08-04 22:11:51
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查看全部 12 个回答
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