24小时热门版块排行榜    

查看: 2188  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

[求助] "6% polyacrylamide sequencing gel"是指什么样的聚丙烯酰胺凝胶?

如题,"6% polyacrylamide sequencing gel"是指什么样的聚丙烯酰胺凝胶?与一般的聚丙烯酰胺凝胶凝胶有什么不同吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-07-22 22:34:34:
以下资料供你参考:
1,加样缓冲液:
    98%去离子甲酰胺
  10mol/L EDTA(pH8.0)
  0.025%二甲苯青FF
  0.025%溴酚蓝
也有人用6*Loading Buffer的,可能会沉不下去,可以用注射器加样。
2,超声清洗 ...

谢谢啦!
我查了查资料说尿素溶解的时候应该55度水浴,然后冷却至室温再加其他的东西,我一直不知道就直接加的21g
我们实验室只能做普通电泳,以前见资料上都是几千V的电压,很是吓了一跳啊O(∩_∩)O~
9楼2011-07-23 01:54:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jyongchao(金币+2): 优秀 2011-07-22 09:27:36
西瓜(金币+5): Good! 2011-07-22 12:18:47
6%聚丙烯酰胺测序胶,现在都没人配制这种胶了吧?
1,蛋白质6%变性PAGE,配制中加入pH6.8的Tris,加了10%的SDS,电泳缓冲液Tris-gly-SDS。
2,非变性PAGE(Native-PAGE),跑DNA。电泳缓冲液TAE、TBE。
3,测序胶:在2的基础上加入7mol/L的尿素。
4,上样缓冲液也有所不同。
5,过硫酸铵和TEMED在DNA凝胶中浓度不随聚丙烯酰胺浓度变化而变化。
2楼2011-07-22 02:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)

楼上正解;可以配置,也可以购买,多家公司有预制胶出售~比如invitrogen~
3楼2011-07-22 09:39:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

谢谢指点,不过还有几个问题搞不太清楚
1、能不能把这种胶用的上样缓冲液配方说下呢?找了好几种,不知道是哪个呀。
2、配60ml的胶就要加25.2g尿素,我配的时候尿素不能完全溶解,是不是要用滤纸过滤一下?
3、这应该属于变性聚丙烯酰胺凝胶了吧,DNA加样前都要加热变性?
4楼2011-07-22 09:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 263求调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 4/200 2026-03-22 21:20 by 1144970272
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +6 tcxiaoxx 2026-03-20 6/300 2026-03-22 20:23 by edmund7
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
信息提示
请填处理意见